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Printed For Final Review: 10/10/03
ECO Number: 27341
7.
RECOGIDA Y PREPARACIÓN DE LA MUESTRA
Para el ensayo hacen falta por duplicado cien microlitros de plasma con EDTA o
suero. Es recomendable tomar la muestra en ayunas.
Para obtener el suero, recoja una muestra de sangre por punción venosa en un tubo
de vidrio vacío de 5 ó 10 mL. Deje que la sangre coagule a temperatura ambiente (20-
25° C). Centrifugue durante 15 minutos a 760 x g* para obtener suero no hemolizado.
Para mantener la integridad de la muestra no se requieren aditivos ni conservantes.
Todos los materiales de plástico, vidrio u otros que entren en contacto con la muestra
deben estar completamente limpios de contaminación.
Para obtener el plasma, recoja una muestra de sangre por punción venosa en un tubo
de vidrio vacío de 5 ó 10 mL. Como anticoagulante se emplea EDTA (7,2 mg/5 mL de
sangre). Centrifugue durante 15 minutos a 760 x g.* Para mantener la integridad de la
muestra no se requieren aditivos ni conservantes. Todos los materiales de plástico,
vidrio u otros que entren en contacto con la muestra deben estar completamente
limpios de contaminación.
Las muestras de suero o plasma deben guardarse congeladas. Los especímenes no
deben someterse repetidamente a ciclos de congelación y descongelación.
8.
EQUIPO Y MATERIALES NECESARIOS PERO NO SUMINISTRADOS
8.1 12 tubos desechables de vidrio de borosilicato de 75 mm
8.2 Centrífuga controlada por temperatura con capacidad para 12 tubos de 75 mm
(20-25° C)
8.3 Contador de centelleo de rayos gamma válido para yodo 125
8.4 Vórtex
8.5 Utensilios de dosificación:
a.
Micropipetas calibradas para suministrar 100 µL, 200 µL y 500 µL
b.
Dispensadores repetitivos calibrados para suministrar 200 µL y 500 µL
8.6 Refrigerador a 2-8° C o baño de hielo picado
8.7 Agua purificada
9.
PROCEDIMIENTO DEL ENSAYO
9.1 Reconstituya el control PTH-MM II niveles 1 y 2 y deje que los reactivos
líquidos se equilibren a temperatura ambiente. Mezcle suavemente todos los
reactivos antes de utilizarlos.
9.2 Prepare y etiquete por duplicado 12 tubos de vidrio de 75 mm según el
programa de ensayo de la última página.
9.3 Añada los reactivos de este modo:
a.
Tubos de cuentas totales
Reservar aparte hasta el paso 5.
b.
Unión no específica (NSB)
100 µL de calibrador 0
c.
Calibrador 0
100 µL de calibrador 0
200 µL de antisuero PTH-MM II
d.
Calibradores PTH-MM II (A-F)
100 µL de calibrador PTH-MM II
200 µL de antisuero PTH-MM II
e.
Control de calidad y sueros desconocidos
100 µL de suero
200 µL de antisuero PTH-MM II
*g = (1118 x 10
10:45 AM
) (radio en cm) (rpm)
-8
2
36
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