Volumen De Retardo Y Volumen Extracolumna; Volumen De Retardo - Agilent Technologies 1290 Infinity Manual De Usuario

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Cómo optimizar el compartimento de columna

Volumen de retardo y volumen extracolumna

Volumen de retardo y volumen extracolumna

El volumen de retardo se define como el volumen del sistema entre el punto
de mezcla en la bomba y la parte superior de la columna.
El volumen extracolumna se define como el volumen entre el punto de inyec-
ción y el punto de detección, excluyendo el volumen en la columna.

Volumen de retardo

En separaciones de gradiente, este volumen provoca un retardo entre el cam-
bio de la mezcla en la bomba y la llegada del cambio a la columna. El retardo
depende de la velocidad de flujo y del volumen de retardo del sistema. En rea-
lidad, esto significa que en cada sistema HPLC existe un segmento isocrático
adicional en el perfil de gradiente al inicio de cada análisis. Por regla general,
el perfil de gradiente es indicado en términos de ajustes de mezcla en la
bomba y el volumen de retardo no se cita aunque afectará a la cromatografía.
El efecto será más significativo a velocidades de flujo bajas y volúmenes de
columna pequeños y puede afectar significativamente a la transferabilidad de
los métodos de gradiente. Por lo tanto, para las separaciones de gradiente
rápidas es importante tener volúmenes de retardo pequeños, especialmente
en columnas de diámetro estrecho (por ejemplo, de 2,1 mm de d.i.) como las
que se suelen utilizar en la detección espectrométrica de masas.
El volumen de retardo de un sistema incluye el volumen en la bomba desde el
punto de mezcla, las conexiones entre la bomba y el inyector automático, el
volumen del paso de flujo a través del inyector automático y las conexiones
entre éste y la columna.
80 Manual de usuario del TCC 1290 Infinity