NOTA
El alginato disuelto se difunde lentamente. Dependiendo del alginato usado y del grosor de la
membrana de la cápsula, se pueden tardar hasta 2 h en que salgan de la cápsula unas cantidades
sustanciales. Para maximizar la eliminación del núcleo, se puede hacer lo siguiente:
•
Prolongar el tiempo de extracción en MOPS o en un medio de cultivo sin iones bivalentes.
•
Cultivar las células en un medio que contenga < 50 mg/l de iones de Ca.
•
Cultivar las células en un medio con un cociente de iones monovalentes (Na
iones bivalentes (Ca
Recomendaciones especiales para las células
Para dividir las células – disuelva el alginato del núcleo; después, mantenga el cociente de
Na/Ca > 20:1 en el medio de cultivo para que el núcleo no se vuelva a solidificar.
Para restablecer las células – puede mantener la estructura del núcleo del alginato como gel y puede
usar incluso Ba
, un ión gelificador más potente que Ca
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soporta la disolución de 50 mM de solución de citrato durante días.
Consulte también: Gröhn P. et al. 1994. Large-scale production of Ba
Langerhans for immunoisolation. Exp. Clin. Endocrinol. 102: p.380-387.
66
, Mg
) de entre 20:1 y 50:1.
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2+
. El Ba-alginato es sumamente estable y
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alginate-coated islets of
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B-395 Pro Manual de instrucciones, versión E
6 Manejo
, K
) frente a
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