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Nota: la resolución de gel de
apilamiento es óptimo cuando
se vierte justo antes de la
electroforesis.
3.4 Preparación de la muestra y la carga
1
Si los pozos ya están en su lugar, vaya al paso 2.
Si es necesario, convertir el gel de apilamiento en la
unidad.
Calcular el monómero gel de apilamiento volumen
de la solución: medir la distancia, en cm, desde la
parte superior del gel de resolución de la muesca de
la placa de alúmina. (Esto debería ser al menos 2 cm
- más si la profundidad de la muestra en el pozo es
inusualmente alta.) Multiplicar esta distancia por el
ancho de gel (8,3 cm) y el espesor de gel (cm). Este
producto es el volumen requerido en ml.
Purgar la solución de gel de apilamiento monómero,
añadir catalizador e iniciador y luego verter. Utilizar
una pipeta para entregar la solución en una esquina
de la placa, teniendo cuidado de no atrapar las burbu-
jas. Insertar un peine (con un ligero ángulo para evitar
el atrapamiento de aire) en el emparedado, permi-
tiendo a los lados de peine para descansar sobre los
espaciadores.
2
Preparar la muestra. Aumentar la densidad de líquido
de muestra con 10% de glicerol o sacarosa. Añadir
un tinte de seguimiento como el azul o el rojo fenol
bromofenol.
Para geles de proteínas SDS, utilice 2X tampón de
tratamiento para desnaturalizar muestras líquidas y en
seco en un tubo de ensayo. Para soluciones de proteí-
nas líquidas, añadir un volumen igual de tampón
de 2X. Para secar las muestras de proteínas, añadir
volúmenes iguales de tampón y H
la concentración deseada. Caliente el tubo en agua
hirviendo durante 90 segundos, luego enfriar en hielo
hasta que esté listo para su uso. Las muestras trata-
das se pueden almacenar congelado para carreras
futuras. (Conservar a -40 °C a -80 °C)
Odd para alcanzar
2
•
p9
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