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5. Solución de problemas
problema
Sonrisa efecto en la parte
frontal de amortiguación
Rayas verticales de proteínas
Inusualmente lento (o rápido)
de ejecución
Las bandas están sesgados
o distorsionados
solución
Para reducir la temperatura de funcionamiento:
• Circular refrigerante a través del núcleo tampón
cámara superior.
• Enfriamiento previo del búfer.
• Disminuya el valor de corriente o voltaje.
(10 mA por gel de 0,75 mm, 15 mA por gel de
1,5 mm de espesor).
• Ejecutar el gel en la cámara fría.
• Centrifugar o filtrar la muestra antes de la carga
para eliminar las partículas.
• Dializar o desalar la muestra.
Ajuste de las soluciones:
• Compruebe recetas, las concentraciones de gel,
soluciones y diluciones. (Por ejemplo, no utilice
Tris-HCl en vez de Tris.)
• Si el pH de una solución requerida se excede, no
valorar en retroceso. Preparar tampón nuevo.
• Deshágase de las soluciones de acrilamida mayores
y utilizar sólo acciones de la más alta calidad.
• Utilice sólo la urea recién desionizada.
Ajuste los valores de voltaje o corriente:
• Para aumentar o disminuir la tasa de migración,
ajustar el voltaje o corriente por 25–50%.
Ver preparación de gel y polimerización:
• Desgasificar el gel de apilamiento solución y evitar
burbujas de aire bajo los dientes del peine.
• Superponer el gel de funcionamiento con agua
saturada de n-butanol antes de la polimerización
comienza a evitar la formación de un gel de
superficie desigual.
Compruebe la preparación de la muestra:
• Dializar o desalar la muestra.
• Centrifugar o filtrar la muestra antes de la carga
para eliminar las partículas.
•
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