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Nota: Para calcular el gradiente
de voltaje, dividir el valor de
voltaje por la distancia entre los
electrodos (12,7 cm).
p8
•
Rápidas, de alta tensión carreras
Algunas aplicaciones, tales como la detección o con-
trol de las muestras de la pureza de la muestra, se
puede lograr rápidamente bajo condiciones de alta
tensión. Enfriar la base de (-20 °C) y limitar la carrera
a 5 minutos o menos a 500 V.
Más lento, más bajo de tensión se ejecuta
Un gradiente de voltaje de 12 V/cm (150 V) se separa
de 0,1 a 23 kb fragmentos de un Hind III del digesto
λ DNA en 30 a 40 minutos (usando 1% en gel de
agarosa y tampón TBE 0,5X funcionando). Alternati-
vamente, usando las mismas soluciones, este ejemplo
puede hacerse funcionar a 24 V/cm (300 V) con reso-
lución banda aceptable en 20 a 30 minutos. Enfriar
la base antes de su uso.
Tabla 1: valores de voltaje y las configuraciones
recomendadas de ejecución
voltaje
gradiente
(V)
(V/cm)
500
40
400
31
300
24
200
16
150
12
* P ara carreras rápidas de 20 minutos o menos, el uso de TBE
0.5X y enfriar la base de hasta -20 °C antes de su uso.
†
Tensión y los tiempos son de agarosa al 1% NA, TBE 0.5X y
una base fría.
Después de la separación
¡Importante! Apague la fuente de alimentación, des-
conecte los cables, y quite la tapa.
Si no bromuro de etidio se añadió al gel o de la
muestra antes de la carrera, mancha el gel en una
solución de 0,5 a 1,0 µg/ml de bromuro de etidio en
agua o tampón.
Limpieza de la unidad como se describe a continuación.
†
tiempo
(min)
5*
10*
20*
30 a 40
30 a 60
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