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Solución de problemas
problema
Muestra deformada, así
Las muestras no se está ejecutando
a lo largo de una trayectoria recta
Haga doble patrón de bandas
Resolución de la banda pobre
Las almohadillas de espuma despega
•
p10
solución
D eje que el gel para establecer un mínimo de 30 minutos y
asegúrese de que esté a temperatura ambiente antes de reti-
rar el peine.
A l retirar el peine, se mantenga en un ligero ángulo y levante
muy lentamente para evitar que el gel se rompa.
T enga cuidado de no dañar el bien con la pipeta durante la
carga de la muestra, objetivo para el centro del pozo y no
perfore la parte inferior con la punta de la pipeta.
Si una bandeja de peine o correr es deformado, reemplace.
Reducir la tensión.
E lija un tampón con la fuerza apropiada iónica y capacidad
tampón. (La capacidad tampón de TBE, por ejemplo, es
mayor que la de TAE.) Si el tampón se agota, detener la
carrera, quitar la tapa, y pipetear el buffer de cada cámara en
la cámara opuesta para reponer el buffer.
S i el gel es desigual, el nivel de la bandeja de colada antes
de verter el gel.
E l peine debe ser vertical para evitar distorsión de la forma bien.
D isminuye el nivel de tampón a 1 mm por encima de la
parte superior del gel, para reducir el gradiente de tempera-
tura vertical.
A ñadir Ficoll
™
, glicerol, sacarosa o al tampón de carga de la
muestra para asegurar que la muestra se hunde hasta el fon-
do del pozo. (Ficoll se prefiere.)
Asegúrese de que la muestra se disuelve completamente.
Reducir la tensión.
Reducir la concentración de la muestra.
Reducir el volumen de la muestra.
P or lo menos 1 mm de gel de debajo del fondo del peine es
necesaria para evitar muestras se salga de la parte inferior.
Reducir la concentración de sal de la muestra.
V er la actividad enzimática, la muestra puede requerir más
tiempo de digestión o un tampón de restricción diferente.
P reparar la muestra fresca si usted sospecha que la contami-
nación con nucleasas.
Elija de agarosa con un valor endósmosis baja.
I nstale la bandeja se ejecuta como tal como se describe en la
página 5, no presione hacia abajo en su lugar.
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