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Margen para la absorbancia negativa
El detector ajusta su ganancia durante el equilibrado de manera que es posi-
ble que la línea de base registre una ligera deriva negativa (aproximadamente
de -100 m UA). En algún caso especial, por ejemplo, cuando se utiliza un gra-
diente con disolventes absorbentes, es posible que la línea de base registre una
mayor deriva a valores negativos.
Sólo en tales casos se ha de aumentar el margen de absorbancia negativa para
evitar la saturación del convertidor analógico a digital.
Optimización de la selectividad
Cuantificación de picos que eluyen simultáneamente mediante la
supresión de picos
En cromatografía, a menudo dos compuestos eluyen juntos. Un detector de
doble señal convencional sólo puede detectar y cuantificar ambos compuestos
independientemente, si sus espectros no se solapan. Sin embargo, en la mayo-
ría de los casos es altamente improbable.
Con un detector de doble canal basado en tecnología de diodos, es posible
cuantificar dos compuestos, incluso cuando ambos absorben en el rango com-
pleto de longitud de onda. El procedimiento se denomina supresión de picos o
sustracción de señal. Como ejemplo, se describe el análisis de la hidroclorotia-
zida en presencia de cafeína. Si se analiza la hidroclorotiazida en muestras
biológicas, siempre hay un riesgo de que la cafeína esté presente, lo que podría
interferir cromatográficamente. Como muestran los espectros en la
en la página 134, la hidroclorotiazida se detecta mejor a 222 nm, donde la
cafeína registra también una absorbancia significativa. Sería, por lo tanto,
imposible con un detector de longitud de onda variable convencional detectar
cuantitativamente la hidroclorotiazida en presencia de cafeína.
LC 1220 Infinity
Detector de diodos LC Agilent 1220 Infinity (DAD)
Descripción del detector
Figura 45
8
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