Fig 6. Verter un gel de gradiente.
Nota: Con Coomassie Blue
posible detectar 1 µg en una
sola banda, con las manchas de
plata más sensibles, es posible
detectar tan poco como 10 ng.
2.2.3 Geles de gradiente
Geles de gradiente lineal se puede verter en la
máquina de colada de gel. Para gradiente de
mezcla fácil, le recomendamos que utilice uno de
los fabricantes Hoefer SG gradiente de la serie.
Geles de gradiente se vierten desde la parte supe-
rior de la rueda con una cánula si se utiliza la
máquina de colada de gel de siempre o desde la
parte inferior si se utiliza una máquina de colada
de gel Hoefer múltiple (vea las instrucciones
que acompañan a la máquina de colada). Una
vez que el gel de gradiente polimeriza, un gel de
apilamiento se vierte.
1
Montar el conjunto de la placa de vidrio en la rueda,
como se describe en la sección 2.1.2.
2
Establecer la solución de monómero trayectoria de
flujo. Ejecutar una longitud de tubo de vinilo trans-
parente a través de una bomba peristáltica. Una un
extremo del tubo al puerto de salida gradiente fabri-
cante y el otro extremo a una cánula de 20 cm. (El
diámetro exterior de la cánula debe ser menor que el
espesor del espaciador.) Coloque la cánula de manera
que descansa en la parte inferior del sandwich, a
medio camino entre los espaciadores.
3
™
, es
Preparar la solución de monómero. Calcular el volu-
men total necesario. Preparar un medio de este volu-
men de más alto y la otra mitad de baja solución de
acrilamida%. (Opcional: Agregar 15% de sacarosa o el
25% de glicerol [concentración final] a la solución%
más alto para mejorar la estratificación.)
•
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