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problema
posible causa
Muestra teñida recoge:
Cerca de la
Gel de concentración
parte delantera
tampón
Degradación
Cerca de la
Gel de concentración
parte superior
del gel cuando
el frente tampón
Precipitación
ha alcanzado la
parte inferior
En la parte
Gel de concentración
superior e
inferior del gel
Seguimiento de
Pobre de
tinte no afilar en
apilamiento
una zona concen-
trada en el gel de
apilamiento
Reactivo de
la calidad
Preparación de la
muestra
remedio
Las moléculas no están lo suficientemente restringido por el
tamaño de poro de gel de resolución de: aumentar la% T.
Las proteínas pueden ser degradadas por proteasas
endógenas: utilizar inhibidores de la proteasa durante la
etapa de aislamiento.
El tamaño de los poros del gel es demasiado pequeño:
disminuir la T% de la resolución (o encima) de gel.
La proteína ha precipitado. Se calienta la muestra a una
temperatura más baja (70 °C o menos) durante 1-2 min.
El rango de peso molecular de la muestra requiere un
gradiente de concentración de acrilamida para resolver la
gama completa de tamaños de las proteínas.
Vierta un gel más alto de apilamiento. (Para obtener los
mejores resultados, permita una altura de apilamiento de gel
de 2,5 veces la altura de la muestra en el pozo.)
Deshágase de las soluciones de acrilamida obsoletas y usar
sólo el grado más alto de la acrilamida.
En la preparación de muestras, evitar el uso de soluciones
con altas concentraciones de sal.
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p29
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