4
Verter la "luz" solución en la cámara de depósito (la
cámara más alejada de la entrada). Abra la llave de
paso el tiempo suficiente para desplazar el aire entre
las cámaras y luego cierre. Verter el "pesado" solución
en la cámara de mezcla y colocar una barra de agit-
ación en esta cámara. Coloque el fabricante de gradi-
ente en un agitador magnético y comenzar de agitar a
un ritmo que no introducir burbujas en la solución.
5
Mezclar el gradiente. Mientras que la solución se
agita, empezar a bombear (5-10 ml / min) desde la
cámara de mezcla e inmediatamente abrir la llave de
paso a la cámara de depósito. Levante la cánula que
entre líquido en el sándwich, manteniendo la punta
en la superficie del gel.
6
Superponer cada gel con una delgada capa de agua
saturada de n-butanol, agua o tampón de gel diluida
para evitar la exposición al oxígeno de gel. Lenta-
mente entregar la solución de superposición de una
jeringa de vidrio equipado con una aguja de calibre
22. Aplicar la solución cerca del espaciador y permitir
que fluya a través de la superficie sin ayuda.
7
Permitir el gel (s) a polimerizar durante un mínimo de
una hora. Después de la polimerización, se vierte la
superposición y enjuagar la superficie del gel varias
veces con agua destilada.
8
Preparar la solución de gel de apilamiento monómero,
verter el gel de apilamiento e introducir un peine (con
un ligero ángulo) en el emparedado, teniendo cuidado
de no atrapar el aire bajo los dientes. Permita un
mínimo de una hora para que el gel se polimeriza.
•
p14