Fig. 5 Procedimiento para la inoculación de muestras de BD ESwab en un agar sólido en placas de Petri
1. Uso de la torunda para
inocular la muestra
Fig. 6 Procedimiento para la extensión de muestras de BD ESwab en placas de Petri de agar para el aislamiento primario
Primer
Segundo
cuadrante
cuadrante
Muestras
Cuarto
Tercer
cuadrante
cuadrante
Preparación de frotis con extensión de Gram de las muestras de BD ESwab
Los análisis de laboratorio de muestras clínicas de torundas recopiladas de algunas partes del paciente pueden incluir
rutinariamente un examen microscópico de las preparaciones teñidas ("frotis directos") utilizando el procedimiento de
tinción de Gram. De esta manera se puede ofrecer información valiosa a los médicos que están tratando pacientes con
enfermedades infecciosas
por ejemplo, con torundas sacadas del endocérvix o uretra masculina para investigar infecciones sospechosas de Neisseria
gonorrhoeae o torundas vaginales para diagnosticar vaginosis bacteriana
juzgar la calidad de la muestra y a contribuir a la selección de medios de cultivo especialmente con flora mixta
Se pueden preparar portaobjetos de microscopio de muestras de pacientes transportadas mediante el sistema de transporte
de BD ESwab para los análisis de tinción de Gram, tal y como se describe a continuación, al coger una muestra de una
parte alícuota de una suspensión agitada con vórtex de la torunda
1. Coja un portaobjetos de microscopio de cristal limpio, colóquelo en una superficie plana e inscriba un área usando un
marcador con punta de diamante o de cristal para identificar dónde se encuentra el inóculo de la muestra.
2. Agite en un mezclador de tipo vórtex o mezcle el tubo de BD ESwab que contiene la muestra de torunda durante 5 s
para liberar la muestra de la punta de la torunda, disperse uniformemente y suspenda la muestra del paciente en el
medio de transporte Liquid Amies.
3. Desenrosque el tapón de BD ESwab y con una pipeta estéril, transfiera 1 o dos gotas del medio Liquid Amies al área
inscrita en el portaobjetos de cristal.
4. Deje que la muestra del portaobjetos se seque al aire o coloque el portaobjetos en un calentador de portaobjetos
eléctrico a 60 °C.
5. Los frotis se pueden fijar con calor o metanol. La fijación mediante metanol puede ser recomendable ya que impide la
lisis de glóbulos rojos y que se dañen las células anfitrionas, por lo que da como resultado un fondo más limpio
6. Siga los manuales de referencia del laboratorio publicados y las directrices para realizar la tinción de Gram. Si se usan
reactivos de tinción de Gram comerciales, es importante seguir las instrucciones del prospecto del fabricante para el
procedimiento de prueba de rendimiento.
Para obtener más información o instrucciones sobre la preparación de portaobjetos de muestras para análisis
microscópicos, sobre procedimientos de tinción de Gram, así como la interpretación y la realización de informes de análisis
microscópicos, consulte los manuales de referencia de laboratorio publicados
CONTROL DE CALIDAD
Todos los números de lote de BD ESwab se prueban para comprobar la esterilidad. Los aplicadores de torunda se
prueban para garantizar que carecen de toxicidad para las bacterias. El medio de transporte de BD ESwab Liquid Amies
se prueba para comprobar la estabilidad del pH y la carga biológica mediante un examen microscópico de tinción de Gram
para garantizar niveles aceptables tal y como se han definido en el estándar aprobado M40-A del Clinical and Laboratory
Standards Institute (CLSI)
comercialización para ver si se mantienen bacterias viables tanto a temperaturas refrigeradas (4–8 °C) como a temperatura
ambiente (20–25 °C) en momentos específicos con un panel de aerobios, anaerobios y bacterias exigentes usando los
métodos Roll-Plate (semicuantitavo) y Swab Elution (elución de torunda)
también incluyen una evaluación de un crecimiento excesivo de bacterias a temperaturas refrigeradas (4–8 °C) que
debería corresponderse a un aumento de ≤1 log en el crecimiento en un momento especificado. Los procedimientos de
2. Uso del pipeteador y de puntas de pipeta
estériles para inocular 100 µL de muestra
Siembre un inóculo primario de la muestra de BD ESwab en la superficie de un medio de cultivo
adecuado siguiendo los procedimientos de microbiología recomendados.
Utilice un asa bacteriológica estéril para extender el inóculo primario en la superficie para aislar
los organismos en los medios de cultivo.
24
. Hay muchas ocasiones en las que un tinte de Gram puede ayudar a realizar un diagnóstico;
4
. Se han realizado controles de calidad de cada lote de producción de BD ESwab antes de su
25-30
. El tinte de Gram también puede ayudar a
17,31
.
16,21,22,24,31
4
. Los estudios de rendimiento de viabilidad
45
31
.
.
23
17,24,31
.