Controle De Qualite - BD ESwab Manual Del Usario

volumétrique et des embouts de pipette stériles. Respecter les techniques de laboratoire standard pour étaler l'inoculum
primaire de l'échantillon patient sur la surface de la boîte de culture (voir la figure 6).
Fig 5. Méthodes d'inoculation des échantillons BD ESwab sur une culture sur gélose solide dans des boîtes de Pétri
1. A l'aide d'un écouvillon
pour inoculer l'échantillon
Fig 6. Méthode d'étalement des échantillons BD ESwab sur la culture de gélose dans les boîtes de Pétri pour
l'isolement primaire 23
Premier Deuxième
quadrant quadrant
Echantillon
Quatrième Troisième
quadrant quadrant
Préparation des frottis de Gram des échantillons BD ESwab
L'analyse de laboratoire des échantillons cliniques écouvillonnés prélevés sur certains sites du patient peuvent inclure
un examen au microscope des préparations à coloration (« frottis directs ») en utilisant la coloration de Gram. Ceci peut
fournir des informations précieuses aux médecins qui gèrent des patients souffrant de maladies infectieuses.
nombreux cas, une coloration de Gram peut aider à la formulation d'un diagnostic ; par exemple, les échantillons prélevés
sur l'endocervix ou sur l'urètre masculin permettent d'examiner les suspicions d'infections par le Neisseria gonorrhoeae
ou les écouvillons vaginaux permettent de diagnostiquer les vaginoses bactériennes.
également aider à déterminer la qualité de l'échantillon afin d'effectuer une sélection optimale des milieux de culture, surtout
en présence d'une flore mixte.
Les lames de microscope contenant les échantillons du patient transportés dans le système de transport BD ESwab peuvent
être préparées pour une analyse par coloration de Gram, comme indiqué ci-dessous, en prélevant un aliquot de suspension
vortexée de l'écouvillon.
1. Prendre une lame de microscope en verre propre, la placer sur une surface plane et tracer des cercles sur une zone à
l'aide d'un marqueur à pointe diamant ou d'un marqueur en verre similaire afin d'identifier l'emplacement de l'inoculum
de l'échantillon.
2. Vortexer ou mélanger le tube BD ESwab contenant l'échantillon écouvillonné pendant 5 s afin de détacher l'échantillon de
l'embout de l'écouvillon, de bien le répartir et de suspendre l'échantillon patient dans le milieu de transport Liquid Amies.
3. Dévisser le bouchon BD ESwab et, à l'aide d'une pipette stérile, transférer 1 à 2 gouttes de milieu Liquid Amies sur la
zone comportant des cercles inscrits sur la lame de verre.
4. Laisser l'échantillon sur la lame sécher à l'air libre ou placer la lame dans un chauffe-lames électrique à 60 °C.
5. Les frottis peuvent être fixés à l'aide de la chaleur ou de méthanol. La fixation au méthanol peut s'avérer préférable
car elle empêche la lyse des globules rouges, évite la détérioration des cellules hôtes et permet d'obtenir un fond plus
propre. 17,24,31
6. Respecter les instructions des manuels de référence publiés et les consignes en vigueur pour procéder à la coloration de
Gram. Si des réactifs de coloration de Gram en vente dans le commerce sont utilisés, il est important de se conformer aux
instructions de la notice du produit fournie par le fabricant pour connaître la méthode de test des performances applicable.
Pour plus d'informations ou d'indications sur la préparation des lames d'échantillons pour l'analyse au microscope, ainsi
que pour plus d'informations sur les méthodes de coloration de Gram et sur l'interprétation et la génération de rapports sur
l'analyse au microscope, consulter les manuels de référence de laboratoire publiés.

CONTROLE DE QUALITE

La stérilité de tous les numéros de lot de BD ESwab est testée et les applicateurs des écouvillons sont testés afin de s'assurer
de leur non-toxicité sur les bactéries. Le milieu de transport BD ESwab Liquid Amies est testé afin de vérifier la stabilité du pH
et la charge microbienne, à l'aide d'un examen au microscope avec coloration de Gram pour s'assurer que les niveaux sont
acceptables et conformes à ce qui a été défini par la norme du CLSI (Clinical and Laboratory Standards Institute) M40-A.
qualité de chaque lot de production de BD ESwab est contrôlée avant leur mise sur le marché afin de vérifier leur capacité
à maintenir la viabilité des bactéries à des températures réfrigérées (de 4 à 8 °C) et à température ambiante (de 20 à 25 °C)
pendant des périodes données, avec une galerie d'aérobies, d'anaérobies et de bactéries exigeantes, en utilisant les techniques
2. En utilisant une pipette et des embouts de
pipette stériles pour inoculer 100 µL d'échantillon
Ensemencer un inoculum primaire d'échantillon BD ESwab sur la surface des milieux de
culture adaptés, conformément aux méthodes de microbiologie en vigueur.
Utiliser une anse stérile de bactériologie pour étaler l'inoculum primaire sur la surface afin
d'isoler les organismes sur les milieux de culture.
31
17,31
25-30
16,21,22,24,31
15
24 Dans de
La coloration de Gram peut
4 La