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Nota: Una vez que las
muestras se encuentran en
los pozos, tener cuidado de
no sacudir los sándwiches de
forma que las muestras no se
derrame o mezclado.
2
Preparar la muestra
Aumentar la densidad de líquido de muestra con 10%
de glicerol o sacarosa. Añadir un tinte de seguimiento
como el rojo fenol, azul de bromofenol, o Y. pironina
Para geles de proteínas SDS, utilice 2X tampón de
tratamiento para desnaturalizar muestras líquidas y en
seco en un tubo de ensayo.
Para soluciones de proteínas líquidas, añadir un
volumen igual de tampón de 2X.
Para secar las muestras de proteínas, añadir
volúmenes iguales de tampón de muestra 2X y
agua de alta pureza para alcanzar la concentración
deseada.
3
Se calienta el tubo en agua hirviendo durante 90
segundos, luego se deja enfriar a temperatura
ambiente. Las muestras tratadas se pueden almacenar
a -40 a -80 °C durante carreras futuras.
Proteínas de membrana de calor a 60 °C durante 20
minutos. No conserve la muestra utilizada a 4 °C.
4
Sirvieron de base al de la muestra en los pocillos
utilizando una microjeringa de punta fina o un gel de
carga punta de la pipeta.
Tabla 2. Volumen de la muestra para el estándar de
tamaños de peine, volumen de la muestra (µl) por la
profundidad de 1 mm
número
de pozos
10
12
15
20
28
1/1 (ref/prep)
1/2 (ref/prep)
espesor de peine (mm)
0,75
1,0
6,2
8,3
5,8
7,7
4,3
5,7
3,1
4,1
2,1
2,7
4/90
6/121
4/85
6/112
1,5
12,4
11,5
8,6
6,2
4,1
9/183
9/171
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p17
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