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Nota: Todas las unidades de la
serie SE600 utiliza de 18 cm de
ancho placas. El espesor de gel
determina la sección transversal
(y el requisito de corriente) para
constantes carreras actuales. La
longitud de la placa determina
el tiempo de ejecución.
Tabla 3: Sistema de tampón
de Laemmli partida
directrices punto
Gel de espesor*
Actual por gel
†
‡
A partir de tensión
80 – 9 0 V
Tensión final
* G eles más gruesas o más delgada
requieren proporcionalmente más o menos
corriente. Por ejemplo, un gel de 0,75 mm,
que es la mitad del grosor de un gel de
1,5 mm, requiere la mitad como mucho de
corriente, o mA 12,5.
†
La corriente debe ser multiplicado por
el número de geles. Por ejemplo, si dos
sándwiches están instalados, los cuatro
geles requieren cuatro veces más actual.
La corriente se puede aumentar más
rápidas carreras si se utiliza enfriamiento
activo y puede ser disminuido por más
lentas carreras durante la noche.
‡
A los 25 mA por gel.
1,5 mm
2 5 mA
corriente
constante
220 – 2 50 V
La separación de la muestra
Electrophoresis parameters for
discontinuous polyacrylamide gels
Los geles se pueden ejecutar en contextos de
tensión constante de corrientes o constantes.
Un modo de corriente constante se utiliza
tradicionalmente con un sistema de tampón
discontinuo de modo que la velocidad de
migración electroforética permanece inalterada
a lo largo de la carrera. Bajo estas condiciones
la tensión aumenta a medida que los ingresos
de ejecución. Un valor más bajo en curso se
recomienda para una mayor resolución. El
nivel óptimo de corriente se debe determinar
empíricamente; los principales factores que
deben equilibrarse incluyen la concentración
del gel y la velocidad de migración, y el
calentamiento Joule y la distorsión resultante
banda. En la tabla 2 como punto de partida
las directrices y los ajustes de grosor del gel, el
número de geles, y la tasa de migración.
Corriente
Actos corrientes sobre el total de área de sección
transversal de todos los geles porque los geles están
conectados en paralelo en el circuito eléctrico. Así, la
configuración actual de un gel debe ser multiplicado
por el número de geles de la misma sección
transversal de ejecución simultáneamente. Para un gel
de 1,5 mm de espesor, se aconseja un ajuste de la
corriente de arranque de 25 mA. (Dos de 1,5 mm de
geles = 50 mA.)
Nota: Puede ser necesario enfriar para controlar el
calentamiento Joule.
Voltaje
El voltaje de partida para un gel de 1,5 mm de losa
conectado a una fuente de alimentación ajustado a
25 mA es generalmente de 80 a 90 V (utilizando
el SE600 con un sistema tampón de Laemmli
discontinua para geles de SDS). El voltaje final es
típicamente 250 a 400 V, dependiendo de la longitud
del gel. (Ver Tabla 3.)
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