Agilent Technologies LC Agilent 1290 Infinity Manual Y Guía De Referencia Rápida página 46

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Optimización del sistema LC Agilent 1290 Infinity
Cómo configurar el volumen de retardo óptimo
Cuando se utiliza la función ADVR, se ha de tener presente que el gradiente ya
se ha iniciado en la bomba en el momento de la inyección. Cabría preguntarse
si el gradiente ya ha alcanzado el inyector automático, en cuyo caso daría
lugar a un pequeño paso en el gradiente. Esto ocurre cuando el volumen de
retardo es inferior al volumen de evacuación y no plantea necesariamente un
problema, pero es un factor que debe considerarse en una transferencia del
método. Con un factor de evacuación de 5 y un volumen de inyección de 10 µl,
el inyector automático permitirá el paso de 50 µl antes de cambiar a la posi-
ción de bypass, con un volumen de retardo de 50 µl, lo que significa que el gra-
diente acaba de alcanzar la válvula de inyección. Los volúmenes de inyección
más pequeños no tendrán ningún efecto. Sin embargo, en el caso de volúmenes
de inyección más grandes, se producirá un pequeño paso en el gradiente. La
velocidad de flujo utilizada también afectará a la decisión de utilizar o no la
función ADVR. A 0,2 ml/min, el tiempo de retardo que se ahorra es de 21
segundos, mientras que a 1,0 ml/min, es de 4 segundos.
Probablemente la función ADVR no es adecuada en el caso de aplicaciones con
compuestos conocidos, ya que generan problemas de arrastre de contaminan-
tes.
Para minimizar la dispersión de picos y el volumen de retardo en el comparti-
mento termostatizado de columna, ha de instalarse el intercambiador de calor
de dispersión baja. El intercambiador de calor de dispersión baja se incluye en
los kit de capilar recomendados para las aplicaciones de dispersión baja. El kit
de capilar común incluye también capilares estrechos de 0,12 mm de d.i. Se
suministran los intercambiadores de calor incorporados de 3 µl y 6 µl para
garantizar la retrocompatibilidad y sólo deberían utilizarse en caso de que se
necesite ejecutar un método convencional, aunque en este caso también sería
posible utilizar el intercambiador de dispersión baja.
Para mantener la resolución en el Detector de diodos Agilent 1290 Infinity, la
celda de cartucho Max-Light posee un volumen de dispersión bajo ( volumen
1,0 µl) y no se necesita ninguna optimización de volumen adicional. Cuando se
utilice la celda de sensibilidad alta Agilent Max-Light alternativa para obtener
un sensibilidad más elevada, el volumen de la celda se optimiza para su utiliza-
ción con columnas de diámetro interno de 3 mm y 4,6 mm.
Para operar con la bomba se recomienda fijar el disolvente correcto en la pan-
talla de configuración de la bomba. Incluso a pesar de que el control inteli-
gente ajusta automáticamente la onda de presión a un mínimo, la
compresibilidad del disolvente puede influir en el mantenimiento de la veloci-
dad de flujo absolutamente correcta a alta presión. Esto garantiza la aplica-
ción en todo momento de valores de compresibilidad correctos para las fases
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