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Procedimientos de funcionamiento — Software
mantenimiento determinado. Para realizar esta
técnica, simplemente introduzca un tubo de
referencia de un producto PCR en la posición 1 del
rotor. El tubo de referencia también debe contener un
reactivo de detección que permita detectar la
disociación de las cadenas.
Al realizar el calentamiento hasta la temperatura de
desnaturalización inicial, por defecto se realizará una
disociación en el canal verde de 80 °C a 95 °C. El
usuario puede ajustar los parámetros de esta
disociación inicial. A partir de estos datos se generará
una curva de disociación que después se analiza
automáticamente.
El pico de disociación se vuelve a referenciar a los
datos sin procesar para obtener un umbral de
desnaturalización. A continuación, el instrumento se
calienta para cada paso de "Optical Denature
Cycling" con la mayor rapidez posible y los datos se
adquieren de forma continua. Cuando el tubo de
referencia haya alcanzado el nivel de fluorescencia
del umbral de desnaturalización, el instrumento se
enfriará inmediatamente y continuará con el siguiente
paso programado del ciclo. Durante el ciclado no se
calculará ningún pico. En vez de ello, el nivel de
fluorescencia se referenciará al pico de disociación,
designándose así el umbral de desnaturalización.
En el gráfico siguiente se han superpuesto los valores
de fluorescencia sin procesar y la primera derivada.
Así se muestra la correspondencia entre el umbral de
Manual del usuario Rotor-Gene Q MDx 09/2018
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