Microscopia De Campo Escuro De Alta Ampliação - Optika Italy B-510 Serie Manual De Instrucciones

12.3 Microscopia de campo escuro de alta ampliação
Para um trabalho mais preciso e fundos mais escuros, você pode escolher um condensador projectado especificamente
para o campo escuro, ou seja, para transmitir apenas raios oblíquos.
Existem várias variedades: condensadores de campo escuro "secos" com ar entre a parte superior do condensador e
a parte inferior da lâmina, e condensadores de campo escuro de imersão que requerem o uso de uma gota de óleo por
imersão (alguns são projectados para usar água) que faz contacto entre a parte superior do condensador e a parte inferior
da lâmina de amostragem.
O condensador de imersão campo escuro tem superfícies internas espelhadas e passa raios de grande obliquidade e
sem aberração cromática, produzindo os melhores resultados e o fundo mais preto.
Talvez o condensador de campo escuro mais amplamente usado é o parabolóide, consistindo em uma parte de vidro
sólido que foi dada uma forma muito precisa de um parabolóide. Como discutido acima, o condensador de campo escuro
seco é útil para objetivas com aberturas numéricas abaixo de 0.75, enquanto os condensadores de imersão cardióides e
parabolóides (Fig. 22) podem ser usados com objetivas de abertura numérica muito alta (até 1.4).
As objectivas com uma abertura numérica superior a 1.2 requerem uma redução da sua abertura de trabalho, uma vez
que a sua abertura numérica máxima pode exceder a abertura numérica do condensador, permitindo assim que a luz
directa entre na objectiva.
Por esta razão, muitas objetivas com grandes aberturas numéricas projectadas para uso com iluminação de campo escuro
e campo claro são feitas com um diafragma de íris ajustável incorporado que actua como um batente do diafragma.
Esta redução na abertura numérica também limita o poder de resolução da objectiva e a intensidade da luz na imagem. As
objectivas especializadas concebidas exclusivamente para trabalho em campo escuro são produzidas com uma abertura
numérica máxima próxima do limite inferior da abertura numérica do condensador de campo escuro.
Eles não têm diafragmas de íris internos, porém os diâmetros de montagem da objetiva são ajustados de modo que pelo
menos uma lente interna tenha o diâmetro ideal para funcionar como um limitador de abertura.
O condensador cardióide é muito sensível ao alinhamento e deve ser posicionado com cuidado para aproveitar o cone de
iluminação muito nítido, tornando o condensador de campo escuro mais difícil de usar.
Além disso, o condensador produz uma quantidade significativa de brilho, mesmo a partir das partículas de pó mais
pequenas, e a distância focal curta pode causar uma iluminação deficiente em objectos que excedam alguns mícrons em
tamanho ou espessura.
Ao escolher as lâminas de microscópio de campo escuro de alta ampliação, certifique-se de seleccionar as lâminas feitas
de uma mistura de vidro livre de impurezas fluorescentes.
Particular atenção deve ser dada aos detalhes da lubrificação de um condensador de alta abertura na parte inferior
da lâmina de amostra. É muito difícil evitar a introdução de pequenas bolhas de ar na área entre a lente superior do
condensador e a parte inferior da lâmina de microscópio e esta técnica deve ser perfeitamente praticada.
Bolhas de ar causarão brilho e distorção da imagem, resultando em perda de contraste e degradação geral da imagem.
Problemas também ocorrem ao usar lâminas de microscópio que são muito grossas ou muito finas.
Muitos condensadores de campo escuro contêm a faixa de espessura da guia utilizável gravada directamente no suporte
do condensador.
Se a lâmina for muito grossa, muitas vezes é difícil focar no condensador sem usar um óleo de imersão de maior
viscosidade. Por outro lado, lâminas muito finas tendem a quebrar a ligação de óleo entre o condensador e a lâmina. É
uma boa ideia comprar lâminas de microscópio com a espessura correta para evitar um dos problemas mencionados
acima.
Os condensadores de alta abertura, destinados a utilização a seco ou oleada, devem ser cuidadosamente centrados no
percurso óptico do microscópio para um desempenho óptimo.
Para conseguir isso, muitos condensadores de campo escuro são construídos com um pequeno círculo gravado na
superfície superior para facilitar a centragem do condensador. A centragem é realizada com uma objetiva de baixa
ampliação (10x-20x), observando o círculo gravado e utilizando os parafusos de centragem do condensador para garantir
que o círculo (e o condensador) estão centrados corretamente no percurso óptico.
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