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Optimización del detector
Reducción de la luz dispersa
Reducción de la luz dispersa
Los filtros de corte se utilizan para eliminar la luz dispersa y de 2.
luz dispersa superior, posibilitando una transmisión completa por encima del
punto de corte y una transmisión escasa o nula por debajo de dicho punto. Se
utilizan entre las redes de difracción de excitación y emisión, para evitar que
la luz dispersa de excitación alcance el tubo fotomultiplicador cuando esté
midiendo la emisión.
Cuando las longitudes de onda de emisión y excitación estén próximas, la dis-
torsión generada por la dispersión limitará seriamente la sensibilidad.
Cuando la longitud de onda de emisión sea el doble que la de excitación, la luz
de 2.
tan elevado, ha de asumirse que el detector está encendido y que no se eluye
muestra a través de la celda de flujo.
La lámpara envía 1 millón de fotones a la celda de flujo (por ejemplo, con una
longitud de onda de 280 nm). La dispersión en la superficie de la celda de flujo
y la generada por las moléculas de disolvente permiten que un 0,1 % de esta
luz abandone la celda, a través de la ventana con el ángulo adecuado para la
luz incidente. Sin un filtro de corte, estos 1.000 fotones restantes alcanzarían
la red de difracción de emisión. Un 90 % se reflejaría totalmente hacia el foto-
multiplicador sin dispersión alguna. El 10 % restante se dispersaría con unas
longitudes de onda de 280 nm (1.
esta luz dispersa, debe utilizarse un filtro de corte con una longitud de onda
en torno a 280 nm.
Debido a la experiencia con un conjunto conocido de aplicaciones, se incor-
pora un filtro de corte de 295 nm que permite trabajar sin perturbaciones
hasta 560 nm sin ningún tipo de riesgo (consulte
132
º
orden será el factor limitante. Para explicar el efecto de la luz de orden
Manual de usuario del detector de fluorescencia Agilent 1260
er
orden) y 560 nm (2.
Figura 51
º
orden o la
º
orden). Para eliminar
en la página 133).