Paso 2: Optimización De Los Límites De Detección Y La Selectividad - Agilent Technologies 1260 Infinity Manual De Usuario

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Utilización del detector de fluorescencia
Desarrollo de métodos
Paso 2: Optimización de los límites de detección y la selectividad
Con el fin de conseguir unos límites de detección y una selectividad óptimos,
los analistas deben averiguar las propiedades fluorescentes de los compuestos
de interés. Las longitudes de onda de excitación y emisión pueden seleccio-
narse para obtener unos límites de detección y una selectividad óptimos. En
general, los espectros de fluorescencia obtenidos con diferentes instrumentos
pueden mostrar diferencias significativas en función del hardware y el soft-
ware utilizados.
La estrategia tradicional consiste en extraer una longitud de onda de excita-
ción adecuada del espectro UV, que sea similar al espectro de excitación de
fluorescencia (consulte
emisión. Después, una vez determinada la longitud de onda de emisión ópti-
ma, se adquiere el espectro de excitación.
Espectro de
excitación con
emisión a 440 nm y
espectro de emisión
con excitación a
250 nm de 1 µg/ml
de quinidina.
Configuración del
detector:
tamaño de paso:
5 nm; PMT 12;
tiempo de respuesta:
4 s.
Figura 30
82
Norm.
Excitación
Espectros de excitación y emisión de la quinidina
Figura 30 en la página 82), y registrar el espectro de
Longitud de onda (nm)
Manual de usuario del detector de fluorescencia Agilent 1260
Emisión