Paso 1: Comprobación De Las Posibles Impurezas Del Sistema Lc - Agilent Technologies 1260 Infinity Manual De Usuario

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Utilización del detector de fluorescencia
Desarrollo de métodos
Paso 1: Comprobación de las posibles impurezas del sistema LC
Para la detección de fluorescencia con valores de trazas, resulta esencial dis-
poner de un sistema LC libre de contaminación fluorescente. La mayoría de
los contaminantes proceden de disolventes impuros. La realización de un
barrido de fluorescencia es un método adecuado para comprobar la calidad
del disolvente en pocos minutos. Esto puede hacerse, por ejemplo, rellenando
la cubeta del detector de fluorescencia directamente con el disolvente para
realizar una medida fuera de línea, incluso antes de comenzar el análisis cro-
matográfico. El resultado puede visualizarse como un gráfico de isofluores-
cencia o tridimensional. Los diferentes colores reflejan diferentes
intensidades.
La
mente impura que iba a utilizarse como fase móvil. El área donde puede verse
la fluorescencia del agua contaminada se sitúa entre las áreas de luz dispersa:
la luz dispersa Rayleigh de primer y segundo orden y la luz dispersa Raman.
Se introdujo una
muestra de agua
pura en la celda de
flujo. Se registraron
los espectros con un
valor de paso de
5 nm.
Figura 29
Dado que las longitudes de onda de "excitación" y "emisión" son iguales para
la luz dispersa Rayleigh, el área de luz dispersa Rayleigh de primer orden
queda visible en la parte superior izquierda del diagrama. Las bandas Raman
del agua pueden verse bajo la luz dispersa Rayleigh de primer orden. Dado que
el filtro de corte elimina la luz por debajo de 280 nm, la luz dispersa Rayleigh
de segundo orden comienza por encima de 560 nm.
80
Figura 29 en la página 80 se corresponde con una muestra de agua ligera-
Impureza 1. orden
Gráfico de isofluorescencia de una fase móvil
Raman
Manual de usuario del detector de fluorescencia Agilent 1260
2. orden