Cálculos De Mediciones De Od600 - Thermo Scientific NanoDrop One Guia Del Usuario

Medir OD600
Cálculos de mediciones de OD600
Como en las aplicaciones de ácidos nucleicos, la
aplicación OD600 utiliza una modificación de la ecuación
Beer-Lambert para calcular la concentración de la
muestra, en la que el coeficiente de extinción y el
camino óptico se combinan y se utilizan como "factor".
La aplicación OD600 permite utilizar un factor
especificado por el usuario junto con la ley de Beer para
calcular la concentración de la muestra. Si conoce el
factor, introdúzcalo. De lo contrario, utilice 1x10
el factor generalmente aceptado para la mayoría de las
suspensiones de células bacterianas como E.coli.
Las concentraciones celulares calculadas se basan en el
valor de absorbancia a 600 nm, el factor introducido y el
camino óptico de la muestra. Se puede aplicar una
corrección de absorbancia de punto único.
158 Guía del usuario de NanoDrop One
Valores medidos
Absorbancia de A600
Nota: Para las mediciones de absorbancia en microvolúmenes y las
mediciones tomadas en cubetas no estándar (las que no son de 10 mm), los
espectros se normalizan en un equivalente de camino óptico de 10 mm.
• Los valores de absorbancia de los cultivos celulares se miden a 600 nm
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, que es
con el espectro normalizado. Cuando no se ha especificado Corrección
de absorbancia, este es el valor de A600 proporcionado y el valor
utilizado para calcular la concentración celular.
• Cuando se ha especificado
el valor de absorbancia normalizada y corregida a 600 nm, que se
utiliza para calcular la concentración celular.
λ
A( ) absorbancia
• También se proporciona el valor de absorbancia normalizada y
corregida (si procede) en cualquier
monitorizada
Camino óptico de la muestra
• Para las mediciones de microvolúmenes, el software selecciona el mejor
camino óptico (entre 1,0 mm y 0,03 mm) en base a la absorbancia de
la muestra en la longitud de onda del análisis.
• Para las mediciones en cubeta, el camino óptico lo determina el ajuste
de Camino óptico de la cubeta en el software (consulte
generales).
• Los valores de absorbancia y espectros mostrados se normalizan en un
camino óptico equivalente de 10 mm.
Valores proporcionados
Concentración celular. Se proporcionan en células/ml. Los cálculos se
basan en la ecuación Beer-Lambert utilizando el valor de absorbancia A600
corregida.
Corrección de
Otra longitud de onda
λ
( ).
absorbancia, se proporciona
Ajustes
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