Mejores Prácticas Para Las Mediciones De Ácidos Nucleicos - Thermo Scientific NanoDrop One Guia Del Usuario

Medir ADNbc, ADNmc o ARN
Mejores prácticas para las mediciones de ácidos nucleicos
Temas relacionados
18 Guía del usuario de NanoDrop One
• Aísle y purifique muestras de ácidos nucleicos antes de eliminar impurezas. Según la
muestra, las impurezas pueden incluir ADN, ARN, nucleótidos libres, proteínas,
componentes de tampón y colorantes. Consulte
más información.
Nota La extracción de reactivos, como la guanidina, el fenol y el EDTA, contribuyen
a la absorbancia entre 230 nm y 280 nm, y su presencia en las muestras (aún en
cantidades residuales) afecta a los resultados de medición.
• Asegúrese de que la absorbancia de la muestra esté dentro de los
absorbancia del instrumento.
• Blanquee con la misma solución tampón utilizada para resuspender el analito de interés.
La solución blanco debe tener los mismos pH y fuerza iónica que la solución del analito.
• Realice un ciclo de blanqueo
tampón. Si la solución tampón manifiesta una fuerte absorbancia en o cerca de la longitud
de onda del análisis (normalmente 260 nm), puede que sea necesario elegir una solución
tampón o aplicación diferentes. Consulte
más información.
• Para mediciones de microvolúmenes:
– Asegúrese de que las superficies del pedestal estén debidamente
acondicionadas.
– Si es posible, caliente muestras con moléculas grandes o de alta concentración, como
las de ADN genómico o de lambda, a 63 °C (145 °F) y agítelas con delicadeza (pero a
fondo) en un vórtex antes de comenzar la medición. Impida la creación de burbujas
durante la mezcla y el pipeteo.
– Siga las Mejores prácticas para las mediciones de microvolúmenes.
– Utilice 1–2 μl de volumen de muestra. Consulte
para obtener más información.
• Para mediciones en cubeta (solo en instrumentos NanoDrop One
compatibles y siga las Mejores prácticas para las mediciones en cubeta.
• Medir una muestra microvolumen
• Medir muestras con una cubeta
• Mejores prácticas para las mediciones de microvolúmenes
• Mejores prácticas para las mediciones en cubeta
Preparación de muestras
para valorar cómo afecta la absorbancia de la solución
Elección y medición de un blanco
Volumen de muestra recomendado
para obtener
límites de detección de
para obtener
limpias y
C
), utilice cubetas
Thermo Scientific