Thermo Scientific NanoDrop One Guia Del Usuario página 84

Medición de Proteínas de A280
La ecuación de la derecha muestra la relación entre
coeficiente de extinción molar (
ε
extinción porcentual ( 1 %).
Para determinar la concentración (c) de una muestra en
mg/ml, utilice la ecuación de la derecha y un factor de
conversión de 10.
Sugerencia: El de NanoDrop One incluye el factor de
conversión cuando proporciona concentraciones
proteínicas.
78 Guía del usuario de NanoDrop One
ε
) y coeficiente de
molar
ε
Conversiones entre
molar
ε ε
( ) * 10 = ( 1 %) * (MW
molar
Ejemplo: Para determinar el coeficiente de extinción de solución porcentual
ε
de la solución ( 1 %) de una proteína que tiene un coeficiente de extinción
-1 -1
molar de 43.824 M cm
Daltons (Da), reorganice y resuelva la ecuación anterior del siguiente
modo:
ε ε
1 % = ( * 10) / (MW
molar
ε
1 % = (43.824 * 10) / 66.400 Da)
ε
1 % = 6,6 g/100 ml
Conversiones entre g/100 ml y mg/ml
C en mg/ml = (A /
proteína
Ejemplo: Si la absorbancia de una muestra de proteína medida a 280 nm
relativa a la referencia es de 5,8 A, la concentración proteínica se puede
calcular así:
ε
C = (A / 1 %) * 10
proteína
C = (5,8/6,6 g/100 ml) * 10
proteína
C = 8,79 mg/ml
proteína
ε
y 1 %
)
proteína
y un peso molecular (MW) de 66.400
)
proteína
ε
1 %) * 10
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