Thermo Scientific NanoDrop One Guia Del Usuario página 228

Espectrofotometros micro-uv/vis
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Centro de formación
Preparar muestras y blancos
Problemas asociados al blanco
• Quedaba muestra residual en el pedestal o en la cubeta
antes de realizar la medición de blanco. (Los espectros de la
muestra podrían manifestar valores de absorbancia
negativos, lo que indicaría un blanco con más absorbancia
que la muestra en esa zona del espectro).
• La medición del blanco manifiesta mayor absorbancia que
la muestra desconocida en la longitud de onda del análisis.
(Si la composición del tampón utilizado como blanco
difiere de la empleada para resuspender la muestra, los
resultados de medición serán incorrectos).
• Se ha utilizado accidentalmente muestra para blanquear el
instrumento. (Los espectros de la muestra podrían
manifestar valores de absorbancia negativos o, en ocasiones,
parecerse a una imagen especular de un espectro de ácidos
nucleicos o proteínas, como en el ejemplo de la derecha).
Solución a problemas de blanqueo
Limpie
a fondo o
reacondicione ambos pedestales
continuación:
Repita el ciclo de blanqueo, o bien
Mida un nuevo blanco utilizando una alícuota nueva
de solución tampón adecuada y, a continuación, mida
una nueva alícuota de muestra desconocida.
• Blanquee con la misma solución tampón utilizada para
resuspender el analito de interés; funciona en la mayoría de
las aplicaciones. La solución blanco debe tener los mismos
pH y fuerza iónica que la solución del analito. Para más
detalles, consulte "Para medir muestras" en la aplicación
utilizada.
• Si continúa el problema de blanqueo, utilice una aplicación
que pueda ser más apropiada, como un ensayo de
fluorescencia con el NanoDrop 3300 o un ensayo
colorimétrico si está midiendo proteínas.
222
Guía del usuario de NanoDrop One
Solución de muestra de proteínas empleada
para blanquear los resultados del instrumento
en espectro de "imagen especular"
y, a
Thermo Scientific

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