Qiagen EZ1 DSP Virus Manual De Uso página 31

Prepare las muestras de heces según se indica en el apartado "Protocolo:

Pretratamiento de las heces" en la página 25.
Prepare las muestras de frotis secos según se indica en el apartado

"Protocolo: Pretratamiento de los frotis secos" en la página 27.
Prepare las muestras respiratorias viscosas según se indica en el apartado

"Protocolo: Pretratamiento de las muestras respiratorias viscosas" en la
página 28. Las muestras respiratorias no viscosas no requieren un
pretratamiento.
Prepare una solución madre de ARN transportador (CARRIER) (con controles

internos (IC) dado el caso) antes de utilizarla por primera vez. Disuelva el
ARN transportador (CARRIER) liofilizado en 310 µl de tampón de elución
(AVE) (incluido en el kit) y mézclelo con el control interno (opcional) tal y
como se describe en "Preparación del ARN transportador (CARRIER)" y "Uso
de un control interno (IC)", páginas 20–21.
Procedimiento
1. Para cada muestra, prepare una solución de 60 µl que contenga
3,6 µl de ARN transportador (CARRIER) disuelto (con control interno
(IC) opcional) en un tubo (ET) de 1,5 ml (incluido en el kit). Mezcle la
solución suavemente pipeteando 10 veces. No la someta a agitación
vorticial.
El tubo (ET) de 1,5 ml se carga en la tercera fila, tal y como lo especifican
las instrucciones en pantalla.
Nota: Asegúrese de que la solución de ARN transportador (CARRIER) esté
en el fondo del tubo (ET) de 1,5 ml para que el instrumento EZ1 transfiera
la cantidad correcta.
2. Transfiera 100 µl, 200 µl o 400 µl de muestra a tubos de muestra
(ST) de 2 ml y equilíbrelos a temperatura ambiente (15–25 °C) antes
de colocarlos en la mesa de trabajo. Si usa muestras congeladas,
descongélelas y equilíbrelas a temperatura ambiente (15–25 °C), y
mezcle bien mediante agitación vorticial.
Nota: Para obtener un rendimiento óptimo, es necesario utilizar los tubos
(ST) de 2 ml proporcionados con el kit.
Nota: No vuelva a congelar muestras descongeladas ni almacene
muestras durante más de 6 horas a 2–8 °C, ya que esto lleva a la
obtención significativamente reducida de ácidos nucleicos virales o de ADN
bacteriano.
Recomendamos utilizar un volumen de muestra de 100 µl, 200 µl o 400 µl.
Para la extracción de los ácidos nucleicos virales o bacterianos de las heces
se recomienda un volumen de muestra de 200 µl. Para el pretratamiento
de las muestras, consulte el protocolo de pretratamiento correspondiente.
Manual de uso del kit EZ1 DSP Virus 03/2015 31