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Sección 3
Análisis de la PCR en tiempo real
Manual de funcionamiento del m2000rt
50-608336/R2—Julio de 2010
La línea de amplificación en tiempo real contiene información
muy específica acerca de la PCR, como información acerca
de la concentración de la secuencia objetivo de entrada
y el rendimiento de la PCR. El proceso de reducción de
datos permite extraer la información relevante de estas curvas,
lo que a su vez permite determinar una respuesta cualitativa
o cuantitativa para la reacción. El método de análisis de datos
del sistema m2000rt proporciona dos respuestas principales
por cada línea de amplificación de la PCR. Una respuesta
corresponde a un valor relacionado con el rendimiento
llamado valor maxRatio (relación máxima), que se usa para
diferenciar las reacciones positivas de las negativas y se basa
en la forma única de la curva de la línea de amplificación.
La segunda respuesta corresponde a un número de ciclo
que se usa para la cuantificación y se relaciona con el
número de entrada de copias objetivo en la reacción.
El software de reducción de datos considera dos tipos básicos
de análisis de las reacciones de ensayo:
•
Una determinación tradicional del número de ciclo
basada en el umbral, comúnmente denominada
método (de ciclo de umbral) de C
•
Un método que usa el análisis de la forma de la curva
que permite determinar un número (fraccionario)
de ciclo, o FCN, asociado con la respuesta de maxRatio.
Principios de funcionamiento
PCR en tiempo real
.
T
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