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Leica Microsystems Heidelberg GmbH
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Captura de una serie Lambda mediante 12 imágenes individuales
Este procedimiento se basa en la premisa de que cada píxel de un bloque de datos se compone de
una superposición lineal de espectros de emisiones de las tinturas fluorescentes utilizadas para la
captura de la imagen. La ilustración
generada mediante la superposición de los espectros de emisión de las tinturas fluorescentes roja y
verde. Mediante los datos de referencia de los espectros de emisión de ambas tinturas pueden
calcularse los coeficientes que describen la proporción de cada tintura en cada banda de detección.
A su vez, este coeficiente permite calcular dos bloques de datos separados a partir de la señal
fluorescente amarilla en los que sólo se encuentra la parte de una tintura.
Navegación: Dye Finder\ Spectral Dye Separation
K
En el visor Experiment Overview, seleccione el bloque de datos de imagen que desea editar mediante un doble clic en el
archivo. Esta opción sólo permite editar series Lambda.
K
En el campo Dye Selection seleccione las tinturas fluorescentes utilizadas para la captura del bloque de datos que desea
editar; para ello seleccione una casilla de verificación y una tintura en el campo de lista.
Si no dispone de los datos de referencia de las tinturas fluorescentes que busca, o si
desea utilizar sus propios datos de referencia, puede importarlos con ayuda del editor
de tinturas.
Principio de la reducción de dimensión
Las series Lambda son imágenes de un solo plano óptico capturadas a lo largo de una gama de
longitudes de onda determinada con una determinada longitud de onda. En este proceso se recoge
en las imágenes individuales información redundante sobre el preparado. Mediante el algoritmo de la
reducción de dimensión puede eliminar la información redundante de las series Lambda. Asimismo,
los datos de imagen de la serie Lambda recogidos en un solo canal de detección se separan en
función de la tintura fluorescente y se representan en canales de detección independientes.
El procedimiento utilizado se basa en el denominado análisis de componentes principales. El
principio de este análisis de componentes principales consiste en transformar datos correlativos en
no correlativos. Para ello se realiza una transformación del sistema de coordenadas. El objetivo de
esta transformación es encontrar los denominados componentes principales (ejes principales) de las
nubes de puntos en el espacio de características de varias dimensiones mediante el desplazamiento
del punto cero y el giro del sistema de coordenadas. Al observar series Lambda en el espacio de
características, cada gama de longitudes de onda en la que se ha capturado una imagen representa
una dimensión.
vea Principio de la separación de tinturas adaptable (página 230)
&
Manual del usuario de Leica TCS SP2 español
Art. n.º: 159330056 / Vers.: 31102002
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muestra la señal fluorescente amarilla de una serie Lambda
Funciones del software LCS:
Descripción de cada función
Página 235 de 320
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