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Leica Microsystems Heidelberg GmbH
Funciones del software LCS:
Descripción de cada función
El orificio de la abertura del diafragma de detección debe ajustarse siempre al objetivo utilizado en
cada momento. Si hace clic en la tecla de pantalla Airy 1 el diafragma de detección se ajusta
automáticamente en función del objetivo utilizado en el valor óptimo de 1 unidad Airy.
Junto con la apertura numérica del objetivo y la longitud de onda de la luz, el diafragma de detección
determina el grosor del corte óptico.
Información adicional
El diámetro del diafragma está ajustado de forma óptima cuando coincide con el diámetro de la
arandela Airy. Se denomina arandela Airy el círculo interior claro de la imagen de difracción de una
fuente luminosa con forma de punto. El diámetro de esta arandela, a su vez, depende de varios
parámetros y, para los sistemas confocales de Leica, se describe de la forma siguiente:
Para calcular el diámetro de la arandela Airy se necesita la longitud de onda de excitación λ (si
existen varias longitudes de onda, debe utilizarse el valor promedio), la apertura numérica NA y el
factor de ampliación M del objetivo. El factor 3,6 se utiliza para la ampliación de componentes ópticos
adicionales del microscopio confocal de Leica.
Si el diafragma se ajusta sobre la arandela Airy se elimina la luz del exterior del plano focal y la
relación señal / ruido es alta. Bajo estas condiciones pueden capturarse cortes ópticos de grosor
mínimo. Cuanto mayor es la abertura del diafragma, más cantidad de luz alcanza al detector. La
imagen es más clara. Pero también se muestran fragmentos de estructuras que están fuera del plano
focal lo que desenfoca la imagen de forma paulatina.
Una ampliación del diámetro del diafragma por encima de una unidad Airy sólo es aconsejable
cuando desean detectarse señales muy débiles.
En la exposición de preparados de las ciencias de los materiales se refleja, en general, suficiente luz
como para cerrar por completo la abertura de detección (es decir, puede ajustarse en el diámetro
mínimo).
Selección del formato de barrido
Función
Al hacer clic en la tecla Format se abre un cuadro de diálogo con una selección de los diferentes
formatos de barrido. Con el formato de barrido se selecciona también la trama utilizada para la
captura de la imagen. Se entiende por trama el número de puntos en que se explora el preparado en
las tres direcciones espaciales. Junto con la apertura numérica del objetivo y la longitud de onda de
excitación, el formato de barrido determina, además del zoom electrónico, la resolución espacial de
los datos capturados.
Información adicional
En la selección del formato de barrido debe tenerse en cuenta la relación entre la trama y la
resolución de la imagen generada. De acuerdo con el teorema de Nyquist (o teorema de muestreo),
sólo es posible reproducir la trama de una estructura sin pérdida de información cuando la distancia
óptica más pequeña aún resoluble se explora con entre 2 y 3 puntos de la trama. Esta distancia aún
resoluble denominada
resolución lateral
depende de la apertura numérica del objetivo y de la
longitud de onda de la luz de excitación utilizada:
El ejemplo siguiente muestra esta relación: Se ha seleccionado, por ejemplo, el objetivo PL APO
Manual del usuario de Leica TCS SP2 español
Art. n.º: 159330056 / Vers.: 31102002
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