Fluor. norm.
0,8
0,7
0,6
0,5
Control positivo alto
0,4
Calibrador IS-MMR
0,3
0,2
0,1
Umbral
0,0
Ilustración 5. Detección de BCR-ABL1 Mbcr con controles y estándares SP1, SP2, SP3, SP5
y SP6. 10
, 10
, 10
, 10
1
2
3
Curvas estándar y criterios de calidad aplicables a los datos
iniciales
Reproducibilidad entre réplicas
La variación de los valores de C
el duplicado debería invalidarse excepto en los casos siguientes:
Si el valor medio de C
los criterios de ∆C
el número de copias (CN) calculado para C
Nota: los usuarios deben medir la reproducibilidad en su laboratorio.
Curvas estándar
Los datos iniciales pueden copiarse a un archivo Excel
Para cada gen (ABL1 y BCR-ABL1 Mbcr), los valores de C
de diluciones de estándares plasmídicos se representan de acuerdo con el
número logarítmico de copias (log): 3, 4, 5 y 6 para SP3, SP4, SP5 y SP6;
1, 2, 3, 5 y 6 para SP1, SP2, SP3, SP5 y SP6. La ilustración 6 muestra un
ejemplo de una curva ABL1 calculada a partir de 4 diluciones estándar. La
ilustración 7 muestra un ejemplo de una curva BCR-ABL1 Mbcr calculada a
partir de 5 diluciones estándar.
Manual del kit ipsogen BCR-ABL1 Mbcr RGQ RT-PCR 12/2014
Ciclo
y 10
copias/reacción.
5
6
entre réplicas debería ser ≤ 2; de lo contrario,
T
es ≥ 36 o si C
T
no son aplicables y el duplicado es válido. En este caso,
T
Control positivo
es ≥ 36 y C
no se detecta, entonces
Ta
Tb
debe dividirse entre 2.
Ta
para analizarlos.
®
bajo
obtenidos a partir
T
35