Análisis De Disociación De Alta Resolución - Qiagen Rotor-Gene Q MDx Manual Del Usuario

Análisis
El análisis de concentración funciona poniendo en relación el nivel de fluorescencia con un valor
de concentración. Hay dos modelos de análisis disponibles. La elección del análisis óptimo
dependerá de los productos químicos y la aplicación.
"Linear Regression" (Regresión lineal) analiza los datos asumiendo que existe una relación lineal
y estimando los valores desconocidos a partir de un modelo lineal generado. Determina el error
de medición examinando la desviación de las lecturas a partir de un modelo lineal. Si las lecturas
de concentración son lineales, este es el análisis más adecuado, ya que proporciona al usuario un
análisis estadístico de variación (analysis of variation, ANOVA).
"Spline Curve Fit" (Ajuste de curva con spline) asume solo que los valores de la concentración
aumentan con la fluorescencia. Aunque este enfoque consigue una estimación más precisa de los
datos no lineales, no puede proporcionar un ANOVA porque no asume el comportamiento lineal
del modelo.
6.6.11 Análisis de disociación de alta resolución
El análisis de disociación de alta resolución (High Resolution Melt, HRM) caracteriza las muestras
a partir de la longitud de la secuencia, el contenido de GC y la complementariedad. Los análisis
de HRM se utilizan en las aplicaciones de genotipado, como análisis de mutaciones genéticas o
de polimorfismos de un solo nucleótido (single nucleotide polymorphisms, SNP), así como en
aplicaciones de epigenética para análisis de estados de metilación de ADN. Los análisis de HRM
proporcionan resultados precisos y un ahorro de los costes de sondas y etiquetas, en comparación
con otros métodos.
Para llevar a cabo un análisis, seleccione Other (Otros) y, después, seleccione High Resolution Melt
Analysis (Análisis de disociación de alta resolución) en la ventana Analysis (Análisis). Haga doble
clic en el canal que desee analizar. Las curvas de disociación del canal sin procesar se
normalizarán calculando el promedio de todos los valores de fluorescencia de inicio y de fin y,
después, forzando los puntos finales de cada muestra para que coincida con el valor promedio.
Manual del usuario de Rotor-Gene Q MDx CE 02/2022 127