Vertido Del Gel - VWR shiroGEL Vertical 20 Manual De Instrucciones

Solución madre de
acrilamida al 30 %
Solución tris 4x
resolutiva
Persulfato de amonio al
10 %

Vertido del gel:

Para geles con capas superpuestas:
1. Inserte el peine entre las placas de vidrio y marque un punto en las placas de
vidrio a 1 cm por debajo de donde terminan las púas del peine. Esto indica dónde
añadir el gel resolutivo.
2. Añada 70µl de TEMED a la solución de gel y mezcle bien, pero evite generar
burbujas de aire.
3. Llene las placas de vidrio otra vez, evitando generar burbujas de aire. El
rellenado debe realizarse rápidamente antes de que el TEMED haga que el gel
se vuelva demasiado viscoso.
4. Recubra el gel con mucho cuidado, con 1 ml de isobutanol, isopropanol o agua
destilada. Cuando use agua destilada, deberá tener aún más cuidado para
asegurarse de que no se mezcle con la solución del gel.
5 Deje que el gel de resolución se polimerice. Normalmente, esto lleva unos 15
minutos, pero esto puede variar debido a la frescura de los reactivos que se usen.
Si la polimerización lleva mucho más tiempo que esto, use soluciones madre más
recientes o añada más APS y TEMED.
6. Prepare el gel de apilamiento, usando la tabla 4 a continuación como guía. Una
vez más, las soluciones madre se dan en las páginas 22 y 23.
Tabla 4.
11,7 17,6 ml
ml
17,6 17,6 ml
ml
700 µl 700 µl
20
23,5 ml 28,2
ml
17,6 ml 17,6
ml
700 µl 700 µl
35,25 41,1 ml
ml
17,6 ml 17,6 ml
700 µl 700 µl