VWR shiroGEL Vertical 20 Manual De Instrucciones página 58

sein. Falls die Polymerisierung sehr viel länger dauert, verwenden Sie frischere
Stammlösungen oder fügen Sie mehr APS und TEMED hinzu.
Vorbereiten & Laden der Proben
Vorbereitung von denaturierten Proteinproben für Ladung:
Die folgenden Instruktionen sind für denaturierte Proben. Für native Proben
konsultieren Sie bitte ein Laborhandbuch.
1. Bereiten Sie die Proben zur Ladung vor. Das Volumen der Proben hängt von der
Kapazität der Schächte ab (siehe Kammspezifizierungen Seite 25).
2. Kombinieren Sie die Proteinprobe und 4 x Probenpuffer unter Verwendung eines
0,5 ml Mikrozentrifugenröhrchens oder eines anderen passenden Gefäßes. Es
ist stets ratsam, Markerprotein in einer der letzten Bahnen zu verwenden, um die
Größe der Banden anzuzeigen. Diese müssen gemäß den Anweisungen des
Herstellers zur Verwendung vorbereitet werden.
3. Erhitzen Sie die Proben im Wasserbad oder einem Heizblock 2 Minuten lang, um
die Proben zu denaturieren.
4. Schleudern Sie die Proben in einer Mikrozentrifuge 20 Sekunden bei
12.000 U/min. Die Proteinproben können nun geladen werden.
Laden der Proben:
1. Transferieren Sie das innere Gelmodul mit den Gussgelen in den Haupttank und
zwar mit der korrekten Orientierung, wie ausgewiesen: (+) auf dem Modul in
Ausrichtung mit (+) auf dem Tank, (-) auf dem Modul in Ausrichtung mit (-) auf
dem Tank.
2. Füllen Sie den äußeren Tank mit 1 x Reservoirpuffer. Siehe Seite 22 für
empfohlene Blotpufferlösung. Tabelle 6 zeigt das Volumen des erforderlichen
Puffers.
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