Immissione Del Gel - VWR shiroGEL Vertical 20 Manual De Instrucciones

Soluzione acrilamide
stock 30%
4 X soluzione Tris di
separazione
Ammonio persolfato
10%

Immissione del gel:

Per gel con strati impilati:
1. Inserire il pettine nelle piastre di vetro e segnare un punto sulle piastre di vetro 1
cm al di sotto del punto in cui finiscono i denti del pettine. Questo indica dove
aggiungere il gel di separazione.
2. Aggiungere 70 µl di TEMED alla soluzione gel e miscelare bene, evitando la
formazione di bolle d'aria.
3. Riempire di nuovo le piastre di vetro evitando la formazione di bolle d'aria. Il
riempimento deve essere eseguito velocemente prima che il TEMED faccia
diventare il gel troppo viscoso.
4. Coprire con estrema attenzione il gel con 1 ml di isobutanolo, isopropanolo (alcool
isopropilico) o acqua distillata. Quando si usa acqua distillata si deve fare ancora
più attenzione per assicurarsi che non ci sia mescolamento con la soluzione gel.
5 Far polimerizzare il gel di separazione. Di solito ci vogliono circa 15 minuti, ma
l'intervallo di tempo può variare in base alla freschezza dei reagenti in uso. Se la
polimerizzazione impiega molto di più, usare soluzioni di stock più fresche o
aggiungere più APS e TEMED.
6. Preparare il gel impilato usando come guida la Tabella 4 qui di seguito. Le
soluzioni di stock sono fornite di nuovo alle pagine 22 e 23.
Tabella 4.
11,7 17,6 ml
ml
17,6 17,6 ml
ml
700 µl 700 µl
20
23,5 ml 28,2
ml
17,6 ml 17,6
ml
700 µl 700 µl
35,25 41,1 ml
ml
17,6 ml 17,6 ml
700 µl 700 µl