VWR shiroGEL Vertical 20 Manual De Instrucciones página 164

polimerizzazione impiega molto di più, usare soluzioni di stock più fresche o
aggiungere più APS e TEMED.
Caricamento e preparazione dei campioni
Preparazione dei campioni di proteine denaturati per il caricamento:
Le istruzioni fornite di seguito sono per i campioni denaturati. Per i campioni nativi, si
prega di consultare un manuale di laboratorio.
1. Preparare i campioni di proteine per il caricamento. Il volume del campione
dipende dalla capacità dei pozzetti (vedere le specifiche del pettine, pag. 25).
2. Usando un tubo microcentrifuga da 0,5 ml o altro recipiente adeguato, combinare
il campione di proteine e 4 tamponi campione. È sempre consigliabile usare
marcatori di proteine in una delle linee finali per indicare le dimensioni delle
bande. La preparazione deve avvenire secondo le istruzioni fornite dal
produttore.
3. Riscaldare i campioni in un bagno d'acqua o riscaldare il blocco per 2 minuti per
denaturare i campioni.
4. Centrifugare i campioni in una microcentrifuga per 20 secondi a 12.000 rpm. I
campioni di proteine sono ora pronti per essere caricati.
Caricare i campioni:
1. Trasferire il modulo del gel interno contenente i gel di colata nel serbatoio
principale con l'orientamento corretto, come indicato, (+) sul modulo allineato con
il (+) sul serbatoio, (–) sul modulo allineato con il (–) sul serbatoio.
2. Riempire il serbatoio esterno con 1 tampone del contenitore. Vedere pagina 22
per la soluzione tampone consigliata della separazione. La tabella 6 mostra il
volume di tampone necessario.
22