Utilisation d'un sandwich de
2 gels avec une triple plaque
– quatre gels
Choix du gel :
Vous devez choisir avec soin la taille de pore de gel à utiliser.
La taille de pore ou le % de gel détermine la capacité de résolution en fonction des
différentes tailles de protéines.
Consultez le tableau 2 ci-dessous qui détaille le pourcentage de gel à utiliser pour
séparer les tailles de protéines indiquées.
Tableau 2.
Pourcentage d'acrylamide Résolution de séparation
5 %
7,5 %
10 %
12 %
15 %
17,5 %
3. Préparez les solutions de gel conformément aux indications des tableaux ci-
dessous. Ces tableaux indiquent les volumes des solutions à partir des solutions
stock standard. Elles doivent être mélangées délicatement pour éviter la formation
de bulles qui empêcheraient la polymérisation en éliminant les radicaux libres.
Tableau 3 : Préparation de la solution de gel de séparation pour deux gels de
20 x 20 cm shiroGEL VERTICAL 20 en utilisant des espaceurs de 1 mm
Solution
Eau distillée
Solution stock
d'acrylamide à 30 %
4 X Solution Tris de
140 ml
60 – 220 KD
30 – 120 KD
20 – 75 KD
17 – 65 KD
15 – 45 KD
12 – 30 KD
5 %
7,5 %
41 ml
35,25 ml
11,7 ml 17,6 ml
17,6 ml 17,6 ml
19
10 %
12 %
29,6 ml
24,7 ml 17,6 ml
23,5 ml
28,2 ml 35,25 ml 41,1 ml
17,6 ml
17,6 ml 17,6 ml
15 %
17,5 %
11,7 ml
17,6 ml