VWR shiroGEL Vertical 20 Manual De Instrucciones página 93

Préparation des échantillons de protéines dénaturées pour le dépôt :
Les instructions fournies concernent les échantillons dénaturés. Pour les
échantillons natifs, veuillez consulter un manuel de laboratoire.
1. Préparez les échantillons de protéines pour le dépôt. Le volume de l'échantillon
dépend de la capacité des puits (voir les spécifications relatives au peigne à la
page 25).
2. À l'aide d'un tube de micro-centrifugeuse de 0,5 ml ou d'un autre accessoire
équivalent, combinez l'échantillon de protéine et le tampon d'échantillon 4 X. Il
est recommandé d'utiliser des marqueurs de protéines à l'une des extrémités
des couloirs pour indiquer la taille des bandes. Ils doivent être préparés
conformément aux instructions du fabricant.
3. Chauffez les échantillons au bain-marie ou dans un bloc chauffant pendant
2 minutes pour dénaturer les échantillons.
4. Centrifugez les échantillons dans une micro-centrifugeuse pendant 20 secondes
à 12 000 tr/min. Les échantillons de protéines peuvent à présent être déposés.
Dépôt des échantillons :
1. Transférez le module de gel intérieur contenant les gels de coulage dans la cuve
principale avec l'orientation appropriée en alignant le (+) du module au (+) de la
cuve et le (-) du module au (–) de la cuve.
2. Remplissez la cuve extérieure avec 1 x de tampon réservoir. Voir la page 22
pour connaître la solution tampon à migrer recommandée. Le tableau 6 indique
le volume de tampon requis.
3. Déposez les échantillons dans les puits à l'aide d'une pipette en veillant à ne pas
endommager les puits ni à former des bulles d'air.
4. Remplissez les puits inutilisés avec 1 X tampon d'échantillon.
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