3M MDA2LMO96 Manual Del Usuario página 23

7. Examiner et confirmer l'analyse configurée sur le Logiciel de détection moléculaire 3M.
8. Cliquer sur le bouton Démarrer du logiciel et sélectionner l'instrument à utiliser. Le couvercle de l'appareil sélectionné
s'ouvre automatiquement.
9. Placer le Plateau de chargement rapide pour système de détection moléculaire 3M dans l'Instrument de détection
moléculaire 3M et fermer le couvercle pour lancer l'essai. Les résultats sont obtenus en 75 minutes ; toutefois, les
résultats positifs peuvent être détectés plus tôt.
10. Une fois l'analyse terminée, retirer le Plateau de chargement rapide pour système de détection moléculaire 3M de
l'Instrument de détection moléculaire 3M et tremper les tubes dans une solution d'eau de Javel à 1-5 % (v:v dans de
l'eau) pendant 1 heure, et ce à l'écart de la zone de préparation des analyses.
AVIS : AVIS : pour réduire le risque de résultats faux positifs dus à la contamination croisée, ne jamais ouvrir les tubes
de réactif contenant de l'ADN amplifié. Ceci comprend les tubes de Contrôle de réactif, de Réactif et de Contrôle de
matrice. Toujours éliminer les tubes de réactif fermés en les trempant dans une solution d'eau de Javel à 1-5 % (v:v dans
de l'eau) pendant 1 heure, et ce à l'écart de la zone de préparation des analyses.
Résultats et interprétation
Un algorithme interprète la courbe de résultats lumineuse provenant de la détection de l'amplification de l'acide nucléique.
Les résultats sont automatiquement analysés par le logiciel et sont codés par couleur en fonction du résultat. Le logiciel
identifie les résultats positifs ou négatifs en analysant un certain nombre de paramètres uniques en ce qui concerne la
courbe. Les résultats présumés positifs sont rapportés en temps réel tandis que les résultats négatifs ou à vérifier sont
affichés à la fin de l'essai.
Les résultats présumés positifs doivent être confirmés selon les procédures standard des laboratoires ou en suivant
la confirmation de la méthode de référence appropriée
enrichissement dans les bouillons de second enrichissement (le cas échéant), puis un étalement et une confirmation des
isolats au moyen des méthodes biochimiques et sérologiques appropriées.
Dans le cadre de la VALIDATION NF, tous les échantillons identifiés comme étant positifs par le Kit de détection
moléculaire Listeria monocytogenes 3M version 2 doivent être confirmés par l'un des tests suivants :
Option 1 : Au moyen des normes ISO 11290
Option 2 : Implémentation d'une méthode de confirmation consistant à : Transférer 0,1 ml de Bouillon demi-Fraser. Tracer
directement sur la gélose Ottaviani Agosti comme indiqué dans la norme ISO 11290
Option 3 : Au moyen de sondes d'acide nucléique, comme indiqué dans la norme EN ISO 7218
partir de gélose sélective (voir les options 1 et 2).
Option 4 : Au moyen d'une autre méthode certifiée par la VALIDATION NF, dont le principe doit être différent du Kit de
détection moléculaire Listeria monocytogenes 3M version 2. Le protocole complet décrit pour cette seconde méthode
validée doit être utilisé. Toutes les étapes précédant le début de la confirmation doivent être communes aux deux
méthodes.
En cas de résultats discordants (présumés positifs avec la méthode alternative, non confirmés par l'une des méthodes
décrites ci-dessus), le laboratoire doit suivre les étapes nécessaires pour garantir la validité du résultat obtenu.
REMARQUE : Même un échantillon négatif n'obtiendra pas un résultat nul : en effet, le système et les réactifs
d'amplification du Kit de détection moléculaire Listeria monocytogenes 3M version 2 disposent d'une unité relative de
lumière (URL) « de fond ».
Dans le cas peu probable d'un résultat lumineux inhabituel, l'algorithme considérera ce dernier comme « À vérifier ». 3M
recommande à l'utilisateur de recommencer l'essai pour tout échantillon considéré comme « À vérifier ». Si le résultat
continue à être « À vérifier », passer au test de confirmation en utilisant les méthodes usuelles ou suivant les méthodes
spécifiques répondant aux normes locales.
20 µL
, en commençant par effectuer un transfert du premier
(1, 2, 3)
en commençant par l'enrichissement demi-Fraser
(3)
11
(Français)
FR
.
(3)
, sur des colonies isolées, à
(5)