Amplifikation
1. Der skal bruges ét reagensglas til hver prøve og NC.
1.1 Reagensglasstrimler kan tilskæres, så de passer til antallet af reagensglas. Vælg antallet af individuelle reagensglas
eller 8-reagensglasstrimler efter behov.
1.2 Anbring reagensglassene i et tomt stativ.
1.3 Undgå at forstyrre reagenskuglerne på bunden af reagensglassene.
2. Vælg 1 Reagens Kontrol (RC)-reagensglas, og anbring det i holderen.
3. For at undgå krydskontaminering åbnes én reagensglasstrimmel ad gangen, og der bruges en ny pipettespids til hvert
overførselstrin.
4. Overfør lysat til reagensglas og RC-reagensglas som beskrevet nedenfor:
Overfør hver lysatprøve til individuelle reagensglas først efterfulgt af NC'et. Hydrer RC-reagensglasset til sidst.
5. Anvend 3M™ Molekylært detektionens luknings-/åbningsredskab - reagens til at åbne reagensglassene - én
reagensglasstrimmel ad gangen. Bortskaf hætten.
5.1 Overfør 20 µl af prøve lysat fra den øverste halvdel af væsken (undgå bundfald) i LS-reagensglasset i det
tilhørende reagensglas. Dosér med en skrå hældning for at undgå at forstyrre kuglerne. Bland forsigtigt ved at
pipettere op og ned 5 gange.
5.2 Gentag trin 5.1, indtil hver individuel lysatprøve er blevet tilføjet til det respektive reagensglas i strimlen.
5.3 Tildæk reagensglassene med de medfølgende ekstrahætter, og benyt den afrundede side af 3M Molekylær
detektionens luknings-/åbningsredskab - reagens for at påføre tryk i en frem- og tilbagegående bevægelse, der
sikrer, at hætten er omhyggeligt fastspændt.
5.4 Gentag trin 5.1 efter behov, for antallet at prøver der skal undersøges.
5.5 Når alle lysatprøver er blevet overført, gentag 5.1 for at overføre 20 µl af NC lysat i et reagensglas.
5.6 Overfør 20 µl af NC lysat til et RC-reagensglas. Dosér med en skrå hældning for at undgå at forstyrre kuglerne.
Bland forsigtigt ved at pipettere op og ned 5 gange.
6. Sæt reagensglassene med låg påsat i en ren og dekontamineret 3M Molekylær Detektions Bakke til hurtig påfyldning.
Luk og lås låget til 3M Molekylær Detektions Bakke til hurtig påfyldning.
7. Gennemgå og bekræft den konfigurerede kørsel i 3M Molekylær detektions softwaren.
8. Klik på startknappen i softwaren, og vælg det instrument, du vil bruge. Det valgte instruments låg åbnes automatisk.
9. Anbring 3M Molekylær Detektions Bakken til hurtig påfyldning i 3M Molekylær Detektions Instrumentet, og luk låget
for at påbegynde analysen. Resultaterne fremkommer inden for 75 minutter, skønt positive resultater kan fremkomme
hurtigere.
10. Når analysen er færdig, fjernes 3M Molekylær Detektions Bakken til hurtig påfyldning fra 3M Molekylær
Detektions Instrumentet, og reagensglassene bortskaffes ved at lade dem ligge i blød i en 1-5 % (v:v i vand)
husholdningsklorinopløsning i 1 time og på god afstand af analyseklargørelsesområdet.
BEMÆRK: For at minimere risikoen for falsk-positiver pga. krydskontaminering må du aldrig åbne reagensglas, der
indeholder forstærket DNA. Dette inkluderer Reagens Kontrol, Reagent og Matrice Kontrol reagensglas. Læg altid
forseglede reagensglas i blød i en 1-5 % (v:v i vand) husholdningsklorinopløsning i en time og på god afstand af
analyseklargørelsesområdet.
Resultater og fortolkning
En algoritme fortolker lyseffektkurven, der er et resultat af detektionen af nukleinsyre-amplifikation. Resultaterne bliver
automatisk analyserede af softwaren og bliver farvekodede baseret på resultatet. Et positivt eller negativt resultat bliver
fastslået ved at analysere et antal unikke kurveparametre. Formodede positive resultater bliver rapporterede i realtid, mens
negative resultater og inspektionsresultater bliver vist, efter kørslen er gennemført.
20 µL
9
(Dansk)
DA