BD ProbeTec Manual Del Usario página 49

pipettiert einen Teil der bereinigten DNA-Lösung aus jedem Extraktionsröhrchen in ein Priming-Mikroschälchen,
um den Inhalt zu rehydrieren. Nach einer kurzen Inkubation wird das Reaktionsgemisch in ein entsprechendes,
vorgewärmtes Amplifikations-Mikroschälchen transferiert, das zur Vermeidung von Kontaminierungen versiegelt
und dann in einem der beiden temperaturregulierten Fluoreszenzmessgeräte inkubiert wird. Das Vorliegen bzw. die
Abwesenheit von C. trachomatis-DNA wird bestimmt durch die Berechnung der Spitzenfluoreszenz (maximale relative
Fluoreszenzeinheiten [MaxRFU]) im Verlauf des Amplifikationsvorgangs und durch den Vergleich dieser Messung mit
einem vordefinierten Schwellenwert.
Zusätzlich zur Fluoreszenzsonde, die zum Nachweis von amplifizierter C. trachomatis-Ziel-DNA verwendet wird,
wird in jeder Reaktion ein zweites fluoreszenzmarkiertes Oligonukleotid hinzugefügt. Das Extraktionskontroll-
Oligonukleotid ist mit einem anderen Farbstoff markiert als dem, der für den Nachweis der C. trachomatis-spezifischen
Ziel-DNA verwendet wird und dient der Bestätigung der Gültigkeit des Extraktionsvorgangs. Die Extraktionskontrolle
wird in den Extraktionsröhrchen getrocknet und wird rehydriert, wenn die Probe und die Extraktionsreagenzien
hinzugefügt werden. Am Ende des Extraktionsprozesses wird die Extraktionskontroll-Fluoreszenz vom BD Viper Gerät
überwacht, und es wird ein automatisierter Algorithmus auf die Extraktionskontroll- und C. trachomatis-spezifischen
Signale angewendet, um die Probenergebnisse als positiv, negativ oder Extraktionskontrollfehler einzuordnen.
REAGENZIEN
Jede Reagenzienpackung des BD ProbeTec CT Q
Priming-Mikroschälchen für den amplifizierten DNA-Test CT Q
110 pmol Oligonukleotide, 45 pmol mit fluoreszierendem Farbstoff markierte Nachweissonde, 80 nmol dNTPs mit
Stabilisatoren und Pufferkomponenten.
Amplifikations-Mikroschälchen für den amplifizierten DNA-Test CT Q
ca. 100 Einheiten DNA-Polymerase und 620 Einheiten Restriktionsenzyme mit Stabilisatoren und Pufferkomponenten.
HINWEIS: Außerdem enthält jeder Beutel mit Mikroschälchen einen Trockenmittelbeutel.
Kontrollenset für den amplifizierten DNA-Test BD ProbeTec CT/GC Q
jeweils ca. 2.400 Kopien von linearisierten pCTB4- und pGCint3-Plasmiden in Trägernukleinsäure und 24 CT/GC Q
Negativkontrollröhrchen mit jeweils nur Trägernukleinsäure. Die Konzentration der pCTB4- und pGCint3-Plasmide
wird mittels UV-Spektralphotometrie bestimmt.
CT/GC Q x Verdünnungsmittelröhrchen für den amplifizierten DNA-Test BD ProbeTec CT/GC Q
ca. 2 mL Kaliumphosphat/Kaliumhydroxidpuffer mit DMSO und Konservierungsmittel
BD FOX Extraktionsröhrchen für den amplifizierten DNA-Test BD ProbeTec CT/GC Q
von denen jedes ca. 10 mg Eisenoxid in löslicher Folie und ca. 240 pmol mit fluoreszierendem Farbstoff markierte
Oligonukleotide enthält.
Extraktionsreagenz und Lysemulde für den amplifizierten DNA-Test BD ProbeTec CT/GC Q
versehene Extraktionsreagenzmulde enthält ca. 16,5 mL bindende Säure, 117 mL Waschpuffer, 35 mL Elutionspuffer
und 29 mL Neutralisierungspuffer mit Konservierungsmittel. Jede Lysemulde enthält ca. 11,5 mL Lysereagenz.
GERÄT, LABORUTENSILIEN UND VERBRAUCHSMATERIALIEN
Mitgeliefertes Arbeitsmaterial: BD Viper Instrument (BD Viper Gerät), BD Viper Instrument Plates (BD Viper
Geräteplatten), BD Viper Pipette Tips (BD Viper Pipettenspitzen), BD Viper Tip Waste Boxes (BD Viper Abfallbehälter
für Spitzen), BD Viper Amplification Plate Sealers (Black) (BD Viper Amplifikations-Plattendeckelsiegel [schwarz]),
BD Viper Lysing Heater (BD Viper Lysierblock), BD Viper Lysing Rack (BD Viper Lysierständer), BD Viper Neutralization
Pouches (BD Viper Neutralisierungsbeutel), Probenröhrchen und Verschlüsse für die Verwendung mit dem BD Viper
System (Extraktionsmodus), Urine Preservative Transport for the BD ProbeTec Q
(Urinkonservierungs- und -Transportkit für den amplifizierten DNA-Test BD ProbeTec Q
Specimen Collection Kit for the BD ProbeTec CT/GC Q
endozervikalen Abstrichen für den amplifizierten DNA-Test BD ProbeTec CT/GC Q
Kit for the BD ProbeTec CT/GC Q
amplifizierten DNA-Test BD ProbeTec CT/GC Q
DNA Assay (Vaginalabstrich-Transportsystem für den amplifizierten DNA-Test BD ProbeTec CT/GC Q
Zubehör.
Benötigtes, jedoch nicht mitgeliefertes Arbeitsmaterial: Nitrilhandschuhe, 1 %iges (Vol. %) Natriumhypochlorit*,
DNA AWAY, 3 %iges (Gew./Vol. %) Wasserstoffperoxid, Chlamydia trachomatis ATCC VR-902B (verdünnt in
phosphatgepufferter Kochsalzlösung) oder Blackhawk AmpliTrol CT/GC.
*200 mL Bleiche mit 800 mL Wasser mischen. Täglich frisch herstellen.
Aufbewahrung und Handhabung: Die Reagenzien können bei 2 – 33 °C gelagert werden. Ungeöffnet sind die
Reagenzienpackungen bis zum Verfallsdatum stabil. Nach dem Öffnen des Beutels sind die ordnungsgemäß
verschlossenen Mikroschälchen 6 Wochen lang bzw. bis zum Verfallsdatum stabil (es gilt der jeweils frühere
Zeitpunkt). Nicht einfrieren.
Warnungen und Vorsichtsmassnahmen
Allgemein:
1. Zur In-vitro-Diagnostik
2. Klinische Proben können pathogene Mikroorganismen wie Hepatitis-Viren und HIV enthalten. Beim Umgang
mit allen durch Blut oder andere Körperflüssigkeiten kontaminierten Artikeln sind die „Allgemeinen
Sicherheitsmaßnahmen"
3. Weitere spezielle Vorsichts- und Warnhinweise sowie Anmerkungen zu BD Viper finden Sie im Benutzerhandbuch
zum BD Viper System.
Proben:
4. Für die Entnahme von Endozervikalabstrichen nur das Kit zur Entnahme von weiblichen endozervikalen
Abstrichen für den amplifizierten DNA-Test BD ProbeTec CT/GC Q
x enthält:
x Amplified DNA Assays (Kit zur Entnahme von männlichen Urethralabstrichen für den
x
), Vaginal Specimen Transport for the BD ProbeTec CT/GC Q
10-13
sowie die einschlägigen Institutionsrichtlinien zu beachten.
x , 12 x 96: Jedes Priming-Mikroschälchen enthält ca.
x : Jedes Amplifikations-Mikroschälchen enthält
x
: 24 CT/GC Q
x Amplified DNA Assays (Kit zur Entnahme von weiblichen
x verwenden.
48
x
Positivkontrollröhrchen mit
x : 48 Röhrchen mit jeweils
x
: 48 Streifen von 8 Röhrchen,
x : Jede mit 4 Aushöhlungen
x Amplified DNA Assays (Q
x [Q x UPT]), Female Endocervical
x ), Male Urethral Specimen Collection
x
), BD ProbeTec
x
x UPT)
x
Amplified