BD ProbeTec Manual Del Usario página 73

ProbeTec Chlamydia trachomatis (CT) Q

Amplified DNA Assay
USO PREVISTO
El análisis BD ProbeTec CT Q
en el sistema BD Viper en modo de extracto, emplea la tecnología de amplificación por desplazamiento de cadenas
(SDA, Strand Displacement Amplification) para la detección cualitativa directa de ADN de Chlamydia trachomatis
en muestras de torunda endocervicales femeninas y uretrales masculinas tomadas por personal clínico, muestras de
torunda vaginales tomadas por la paciente (en un entorno clínico) y muestras de orina masculinas y femeninas. El uso
de este análisis está indicado en el caso de pacientes tanto sintomáticos como asintomáticos, y su función es ayudar en
el diagnóstico de la enfermedad urogenital causada por clamidias.
RESUMEN Y EXPLICACIÓN
La Organización Mundial de la Salud (OMS) calcula que cada año se diagnostican en el mundo 92 millones de
nuevos casos de infección causada por Chlamydia trachomatis
enfermedad infecciones de mayor incidencia, con más de 1.000.000 de casos en 2006, y con una tasa de incidencia
tres veces superior en mujeres que en hombres.
durante los últimos diez años debido, en gran medida, al desarrollo de programas de detección dirigidos a pacientes
asintomáticos y al uso de pruebas de diagnóstico cada vez más sensibles. Entre un 70 y un 90 por ciento de las
infecciones por clamidias en mujeres son asintomáticas, con lo que es posible que la mujer infectada desarrolle
problemas de salud de larga duración antes de saber incluso que corría ese peligro
puede ser causa de secuelas tales como la enfermedad inflamatoria pélvica y la esterilidad, además de contribuir a la
gestación de niños de peso reducido. A su vez, el 50 por ciento de los hombres infectados con C. trachomatis también
son asintomáticos y, en caso de no recibir el tratamiento adecuado, la infección puede derivar en uretritis aguda o
epididimitis y proctitis crónica. La transmisión de la bacteria C. trachomatis se produce por contacto sexual, aunque
también puede transmitirse en el canal del parto, lo que a su vez puede provocar conjuntivitis y/o neumonía por
clamidias en el recién nacido
Existen tratamientos antibióticos eficaces para las infecciones por clamidias y el Advisory Committee on Human
Immunodeficiency Virus (HIV) and Sexually Transmitted Disease (STD) Prevention (Comité estadounidense para la
prevención del virus de inmunodeficiencia humana [VIH] y las enfermedades de transmisión sexual [ETS]) fomenta
el desarrollo de programas de control activo que contemplen las ETS como un factor de intervención primario en el
control de la epidemia de VIH
Preventive Services Task Force (Grupo de trabajo estadounidense sobre servicios de prevención) ha publicado una serie
de recomendaciones para la detección de la infección en mujeres jóvenes sexualmente activas y mujeres de mayor
edad que pertenezcan a algún grupo de riesgo
Las clamidias son bacterias intracelulares obligadas gramnegativas que forman cuerpos de inclusión intracelulares
característicos que pueden observarse en un cultivo celular mediante microscopia fluorescente tras la aplicación de
una tinción específica del antígeno
grupos, cada uno de los cuales se asocia a un estado de enfermedad diferente: los serotipos que causan tracoma (A-C),
los serotipos que causan lesiones oculogenitales (D-K) y los serotipos que causan linfogranuloma venéreo (L
métodos actuales para el diagnóstico de la infección por C. trachomatis incluyen el cultivo y los análisis inmunológicos,
así como la detección de ácidos nucleicos mediante amplificación o hibridización directa. Aunque históricamente el
cultivo ha sido el patrón de referencia para la detección de C. trachomatis, la sensibilidad superior de los métodos
amplificados ha conducido a la adopción cada vez mayor de este tipo de métodos que, a su vez, ha contribuido al
aumento en el número de casos de infección diagnosticados.
Cuando se utiliza con el sistema BD Viper, el análisis de ADN amplificado CT Q
automatizada del ADN basado en óxido ferroso de las muestras clínicas. Este proceso de extracción emplea la
tecnología de extracción BD FOX, que consiste en la lisis celular química, seguida de la unión del ADN a partículas
paramagnéticas, el lavado del ácido nucleico ligado y la elusión en un tampón adecuado para la amplificación. En
caso de estar presente, el ADN de la bacteria C. trachomatis se detecta a continuación mediante la amplificación por
desplazamiento de cadenas (SDA) de una secuencia específica con la ayuda de una sonda de detección marcada con
8,9
fluorescencia .
PRINCIPIOS DEL PROCEDIMIENTO
El análisis de ADN amplificado BD ProbeTec CT Q
y transporte de muestras BD ProbeTec Chlamydia trachomatis/Neisseria gonorrhoeae (CT/GC) Q
correspondientes, el sistema BD Viper y la tecnología de extracción BD FOX. Las muestras se recogen y transportan
en sus respectivos dispositivos de transporte, que protegen la integridad del ADN de la bacteria C. trachomatis en los
intervalos de temperatura y tiempo especificados.
Las muestras de orina y de torunda deben someterse a un paso de calentamiento previo en la estufa de lisis BD Viper
cuyo objetivo es disolver el moco y homogeneizar la muestra. Una vez enfriadas, las muestras se cargan en el sistema
BD Viper, que ejecuta a continuación todos los pasos del proceso de extracción y amplificación del ADN analizado sin
que sea necesaria la intervención del usuario. La muestra se transfiere a un tubo de extracción que contiene partículas
de óxido férrico en una película soluble y control de extracción deshidratado. A continuación, se aplica un pH alto
para lisar las células bacterianas y provocar que el ADN de éstas se libere en la solución. Después, se añade un ácido
para reducir el pH e inducir la carga positiva del óxido férrico que, como consecuencia, se une al ADN con carga
negativa. Seguidamente, las partículas y el ADN ligado son atraídos hacia los laterales del tubo de extracción mediante
imanes y la muestra tratada se aspira y se desecha. A continuación, se lavan las partículas y se añade un tampón de
elución de pH elevado para recuperar el ADN purificado. Por último, se utiliza un tampón de neutralización cuya
finalidad es hacer que el pH de la solución extraída sea el óptimo para la amplificación del objeto de análisis.
x Amplified DNA Assay (Análisis de ADN amplificado CT Q
2 . La tasa de incidencia de la infección por clamidias ha aumentado
4 .
5 . Además, con el fin de evitar complicaciones y reducir la tasa de transmisión, el US
3,6
.
7
. Se reconocen quince serotipos de C. trachomatis que, a su vez, se clasifican en tres
x
se ha diseñado para su uso con los dispositivos de recogida
1 . En Estados Unidos, la infección por Chlamydia es la
x BD ProbeTec implica la extracción
72
x BD ProbeTec), cuando se realiza
3
. La bacteria C. trachomatis
x , los reactivos
x
Español
–L ). Los
1 3