Beckman Coulter IM3632 Manual De Instrucciones página 111

Stem-Trol kontroles šūnas
IM3632
In vitro diagnostikas lietošanai
PAREDZĒTĀ LIETOŠANA
Stem-Trol kontroles šūnas ir pārbaudīts kvalitātes kontroles produkts imūnofenotipēšanas analīzei, izmantojot CD45 un/vai
CD34 monoklonālo antivielu reaģentus un plūsmas citometriju. Tas nodrošina pozitīvu šūnu kontroli, kas tiek apstrādāta
tādā pašā veidā kā asins paraugs, kad Stem-Trol kontroles šūnas tiek ievietotas perifērās pilnasins paraugā. Tas ļauj
verificēt reaģenta veiktspēju un metodes, ko izmanto, lai iekrāsotu mērķa šūnas (t. i., CD34+ hematopoētiskas progenitora
šūnas HPC), līzētu eritrocītus un analizētu paraugus ar plūsmas citometriju.
Ja veicat manuālo analīzi, pilnīgas lietošanas instrukcijas skatiet Stem-Kit reaģentu (REF IM3630) lietošanas instrukcijā. Ja
izmantojat automatizēto metodi, pilnīgus norādījumus skatiet rokasgrāmatā stemCXP System Guide (sistēmas stemCXP
rokasgrāmata), kas iekļauta sistēmas programmatūras stemCXP komplektā.
KOPSAVILKUMS
Imūnfenotipēšanas analīze, izmantojot plūsmas citometriju, ietver mērķa šūnu identifikāciju un uzskaitījumu bioloģiskos
paraugos. Interesējošie paraugi tiek iekrāsoti ar monoklonālām antivielām, un eritrocīti tiek līzēti pirms plūsmas
citometrijas analīzes. Lai pārbaudītu reaģentu veiktspēju, paraugu sagatavošanas metodes un krāsošanas procedūras,
nepieciešama pozitīva šūnu kontrole (1). Pozitīvajai šūnu kontrolei vajadzētu imitēt reprezentatīvu mērķa šūnu attiecībā
uz monoklonālās antivielas veiktspēju, eritrocītu līzēšanu un plūsmas citometrijas analīzi.
Stem-Trol kontroles šūnas ir šķidrs stabilizētu KG-1a atvasināto šūnu, kurām ir antigēna ekspresija un CD45 un CD34
iekrāsošanās īpašības, kas reprezentē tās, kas atrodamas CD34+ HPC, preparāts.
PRINCIPS
Stem-Trol kontroles šūnas ir saglabātas KG-1a šūnas, kas ir modificētas un stabilizētas, lai ekspresētu CD34 III klases
epitopus (2) un CD45 leikocītu kopējo antigēnu tādā blīvumā, kas aptuveni atbilst normālām nenobriedušām cilvēka
hematopoētiskām šūnām. Stem-Trol kontroles šūnu maisījums, kas pievienots normālai svaigai pilnasinij, vispirms tiek
iekrāsots ar monoklonālu antivielu reaģentiem un 7-AAD dzīvotspējas krāsvielu, bet pēc tam līzēts, lai atdalītu eritrocītus.
Tiek pievienotas Stem-Count vai Flow-Count fluorosfēras, lai tieši noteiktu absolūto skaitu. Mērķa šūnu absolūtais skaits
tiek noteikts, iekrāsotajam un līzētajam preparātam veicot plūsmas citometrijas analīzi. Paredzamos rezultātus nosaka,
paraugu analizēšanas nolūkam izmantojot Stem-Kit reaģentus apstiprinātās un standartizētās plūsmas citometru sistēmās
FC 500, kas aprīkotas ar sistēmas programmatūru CXP (versiju 2.0).
REAĢENTI
Stem-Trol kontroles šūnas ir suspendētas izotoniskā šķīdumā, kas satur stabilizētājus un liellopu seruma albumīnu (BSA).
Testētā šūnu koncentrācija (šūnas/µl) ir atvasināta no vairākkārt atkārtotām analīzēm, izmantojot atsauces metodi. Partijai
specifiskā vērtība ir norādīta uz flakona etiķetes.
BRĪDINĀJUMI UN PIESARDZĪBAS PASĀKUMI
1. Ar klīniskajiem materiāliem, paraugiem un visiem materiāliem, kas nonāk saskarē ar tiem, jārīkojas kā ar infekciju
pārnesējiem un jāiznīcina ar atbilstošu piesardzību.
2. Nekad neņemiet pipeti ar muti un izvairieties no paraugu vai reaģentu saskares ar ādu un gļotādu.
3. Nelietojiet reaģentu pēc derīguma termiņa beigām, kas norādītas uz flakona marķējuma.
4. Reaģentus nedrīkst sasaldēt.
5. Uzglabāšanas vai lietošanas laikā reaģentu nepakļaujiet karstumam.
6. Izvairieties no reaģenta iztvaikošanas un noplūdes, cieši aiztaisot flakonus pēc lietošanas, citādi var rasties kļūdaini
rezultāti.
7. Stem-Trol kontroles šūnas izgulsnēsies ilgākos laika periodos. Nodrošiniet, lai pirms lietošanas šūnas tiktu pilnībā
atkārtoti suspendētas. Lai samazinātu gaisa burbuļu veidošanos, izvairieties no pārmērīgas maisīšanas. Nepipetējiet
gaisa burbuļus; pretējā gadījumā rezultātos var rasties kļūda.
8. Izmantojiet kalibrētu pozitīvo maināmo uzgaļu virzuļpipeti vai atkārtotāja pipeti, lai sadalītu paraugus un Stem-Trol
kontroles šūnas, citādi var rasties kļūdaini rezultāti.
9. Izmantojiet pipetes ražotāja ieteikto pipetēšanas tehniku, lai nodrošinātu rūpīgu un precīzu parauga un Stem-Trol
kontroles šūnu pipetēšanu, citādi var rasties kļūdaini rezultāti.
10. Katrai Stem-Trol kontroles šūnu partijai ir specifiska šūnu koncentrācija. Ir jānodrošina, ka absolūtā skaita rezultātu
noteikšanai tiek lietota pareizā analizējamā koncentrācija.
B60231–AE 111 of 128