Beckman Coulter IM3632 Manual De Instrucciones página 30

Células de control Stem-Trol
IM3632
Para uso diagnóstico in vitro
INDICACIONES
Las Stem-Trol Control Cells es un producto de control de calidad preparado para el análisis del inmunofenotipo
utilizando los reactivos anticuerpos monoclonales CD45 o CD34 y la citometría de flujo. Asimismo, proporciona un
control positivo de células que se procesa de la misma manera que una muestra de sangre cuando las Stem-Trol
Control Cells se introduce en la muestra de sangre entera periférica. Este hecho permite la comprobación del
rendimiento del reactivo y de los métodos utilizados para la tinción de las células de interés (es decir, CD34+
células hematopoyéticas progenitoras, HPC), la lisis de los eritrocitos y el análisis de las muestras por citometría
de flujo.
Consulte el folleto de los reactivos Stem-Kit (REF IM3630) para obtener una información más completa si se realiza
el análisis de forma manual. Para obtener instrucciones completas si usa el análisis automatizado, consulte la
stemCXP System Guide (Guía del sistema stemCXP) proporcionada con el software del sistema stemCXP.
RESUMEN
El análisis del inmunofenotipo por medio de la citometría de flujo consiste en la identificación y enumeración de las
células de interés en las muestras biológicas. Antes de realizar el análisis por citometría de flujo, las muestras de
interés se tiñen con anticuerpos monoclonales y los eritrocitos se lisan. Se requiere un control positivo de células
para verificar el rendimiento del reactivo, los métodos de preparación de muestras y los procedimientos de tinción
(1). Un control positivo de células debería imitar una célula de interés representativa en términos de rendimiento
del anticuerpo monoclonal, la lisis de eritrocitos y el análisis por citometría de flujo.
Las Stem-Trol Control Cells son una preparación líquida de KG-1 estabilizada procedente de las células que
tienen expresión de antígeno y propiedades de tinción del CD45 y CD34 representativas de las que se hayan en
CD34+HPC.
PRINCIPIO
Las Stem-Trol Control Cells son células KG-1a preservadas que se han modificado y estabilizado para expresar
los epítopos CD34 de clase III (2) y el antígeno común leucocitario CD45 en densidades que se aproximan a la
de las células hematopoyéticas humanas inmaduras normales. Primero se tiñe una mezcla de Stem-Trol Control
Cells inyectada en sangre total fresca normal con los reactivos de anticuerpos monoclonales y el marcador
de viabilidad 7-AAD y, posteriormente, se lisa para eliminar los eritrocitos. Se añaden luego las Stem-Count
o Flow-Count Fluorospheres para determinar directamente el recuento absoluto. El análisis por citometría de
flujo de la preparación teñida y lisada determina el recuento absoluto de las células blanco. Los resultados
esperados se determinan utilizando los reactivos Stem-Kit en sistemas de citómetro de flujo FC 500 validados y
estandarizados equipados con el software del sistema CXP (versión 2.0) para analizar las muestras.
REACTIVOS
Las Stem-Trol Control Cells se suspenden en una solución isotónica que contiene estabilizadores y seroalbúmina
bovina (BSA). La concentración celular ensayada (cel/µL) procede de análisis de múltiples repeticiones utilizando
el método de referencia. El valor específico se indica en la etiqueta del vial.
ADVERTENCIAS Y PRECAUCIONES
1. Las muestras y todo el material que entre en contacto con ellas deben manipularse como si fueran capaces
de transmitir enfermedades infecciosas y deben desecharse tomando las precauciones adecuadas.
2. No pipetee nunca con la boca y evite que las muestras o reactivos entren en contacto con la piel y las
membranas mucosas.
3. No use el reactivo después de la fecha de caducidad indicada en la etiqueta del vial.
4. No congele los reactivos.
5. No exponga los reactivos a fuentes de calor durante la conservación o el uso.
6. Evítense la evaporación y pérdida de los reactivos cerrando correctamente los frascos después de utilizarlos;
de lo contrario, pueden producirse resultados erróneos.
7. Las Stem-Trol Control Cells se asientan durante períodos prolongados de tiempo. Asegúrese de que las
células están resuspendidas por completo antes de utilizarlas. Evite mezclar en exceso a fin de reducir al
máximo la formación de burbujas de aire. No pipetee burbujas de aire, ya que pueden generarse resultados
erróneos.
B60231–AE 30 of 128