Beckman Coulter IM3632 Manual De Instrucciones página 94

Stem-Count veya Flow-Count Fluorospheres singletleri G Bölgesinin Adı olarak "CAL" yazın ve SET-UP SCREEN
PROTOCOL (Kurulum Ekranı Protokolü) menüsünün STATISTICS (İstatistik) iletişim kutusundaki CAL FACTOR
(Kalibrasyon Faktörü) kutusuna 1000 gibi bir değer girin.
Stem-Count veya Flow-Count Fluorospheres için CAL Faktörü Girme:
1. Acquisition Run (Edinme Çalışması) ekranında Setup Screen (Kurulum Ekranı) >> Protocol (Protokol) öğesini
seçin.
2. Statistics (İstatistikler) >> CAL FACTOR (Kalibrasyon Faktörü) öğesini seçin.
3. Stem-Count veya Flow-Count Fluorospheres şişesinden CAL faktörü numarasını (test edilen konsantrasyon)
girin.
4. ENTER tuşuna basın.
5. OKAY (Tamam) öğesini seçin.
6. Sorulduğunda evet için Y yazın.
En az 1000 florosfer singleti elde edildiğinde CD34
ayarlanır ve doğrudan D Bölgesi istatistik çıktısı sonuçlarından alınabilir.
Tablo (aşağıda):
System II Yazılımı üzerinde CAL FACTOR (Kalibrasyon Faktörü) işlevi kullanılarak TROL 45/34/7-AAD tüpü ile
elde edilen istatistiklerin örneği, burada:
• 1024, Stem-Count Fluorospheres Test Edilen Konsantrasyonudur.
• 5248, tam edinme süresi boyunca CAL bölgesinde biriken toplan florosfer sayısıdır.
Bu örnekte tüm sayımlar şuna göre ayarlanmıştır: 1024/5248.
Stats (İstatistikler):
Not Normalized Hist
(Normalleştirilmemiş
Histogram)
1
2
3
4
7
5
1. Ayarlanmış mutlak sayımları (hücre/µL) TROL 45/34/7-AAD Tüplerinden D Bölgesine kaydedin.
.
Örnek:
.
TROL 45/34/7-AAD tüpü: Stem-Trol Control Cells = 248 hücre/µL.
2. Bu kesin sayıyı normalleştirme faktörü (N) = 5 ile çarpın.
.
NOT:
.
Test sırasında eklenen hacimler bakımından Stem-Trol Control Cells mutlak sayımının normalleştirilmesi gerekir: sayma
referansı (Stem-Count Fluorospheres singletleri) hacmini test tüpüne eklenen Stem-Trol Control Cells hacmine bölerek N
değerini belirleyin.
.
. .
Örnek:
.
100 µL Stem-Count Fluorospheres, 20 µL Stem-Trol Control Cells'e eklenir:
.
N = 100 ÷ 20 = 5
.
Normalleştirilmiş Stem-Trol Control Cells mutlak sayımı = 248 x 5 = 1240 hücre/µL.
3. Elde edilen Stem-Trol Control Cells mutlak sayımını Stem-Trol Control Cells ile karşılaştırarak doğrulayın.
B60231–AE
Stem-Trol Control Cells için mutlak sayım otomatik olarak
+
Liste geçitleme:
Bölge Kimliği
Devre Dışı
A LEUKS
B CD34 POS
C CD45 DIM
D Stem-Trol Control
Cells
G CAL 1024
H Tüm Stem-Count
Fluorospheres
94 of 128
Counts Adjusted
(Ayarlanan
Sayımlar)
(Hücre/µL)
9.798
279
264
248
1.024
1.046