Területek létrehozása
Hozzon létre területeket a következők szerint:
1. 1. hisztogram – Hozza létre az egyenes vonalakkal határolt A területet, amely tartalmazza az összes CD45
fehérvérsejtet, és nem tartalmazza a trombocitákat, a vörösvértest-törmelékeket és az aggregátumokat.
2. 1. hisztogram – Hozzon létre egy AMORPHOUS (amorf) E területet, amely a limfocitákat [erős CD45 festődés,
alacsony Side scatter (oldalra szóródás)] tartalmazza.
3. 2. hisztogram – Hozzon létre egy egyenes vonalakkal határolt B területet a 2. hisztogramon, amely
tartalmazza az összes olyan CD34
Scatter). Állítson be 75 000 eseményt (CD45
4. 3. hisztogram – Hozzon létre egy AMORPHOUS (amorf) C területet a 3. hisztogramon, amely tartalmazza
az összes halmozott, CD45
5. 4. hisztogram – Hozzon létre egy AMORPHOUS (amorf) D területet a 4. hisztogramon, amely tartalmazza az
összes halmozott eseményt közepes side scatter (oldalra szóródás) és közepestől magasig terjedő Forward
Scatter (előre szóródás) mellett.
6. 5. hisztogram: Hozzon létre egy Quadstat I területet az 5. hisztogramon, a CD34
expressziója alsó határértékének igazolására.
7. 5. hisztogram – Hozzon létre egy AMORPHOUS (amorf) H területet az 5. hisztogramon, amely tartalmazza
az összes Stem-Count vagy Flow-Count Fluorospheres gömböt, beleértve a duplákat is. A H területnek az 5.
hisztogram jobb felső sarkában kell lennie.
MEGJEGYZÉS: Győződjön meg arról, hogy a H terület AMORPHOUS (amorf) területként van
8. 6. hisztogram – Másolja a 4. hisztogramon található D területet a 6. hisztogramon található F területre.
9. 7. hisztogram – Hozzon létre egy egyenes vonalakkal határolt G területet a 7. hisztogramon, amely csak az
egyedi Stem-Count vagy Flow-Count Fluorospheres gömböket tartalmazza. A G területnek adható a „CAL"
címke, hogy lehetővé tegye a CD34
részletek a készülék kézikönyvében találhatók).
10.8.
hisztogram – Hozza létre az egyenes vonalakkal határolt J területet a 8.
élő
fehérvérsejteknek
Stem-Trol Control Cells) sejteket jelző eseményektől való elkülönítésére.
Kapu létrehozása
Hozzon létre kapukat a következők szerint:
1. 1. hisztogram – Jelölje ki a „H" területet az 1. hisztogramon, amely tartalmazza az összes eseményt, kivéve
a Stem-Count vagy Flow-Count Fluorospheres gömböket. A „not gates" („nem" típusú kapuk) létrehozásával
kapcsolatban tekintse át a készülék kézikönyvét.
2. 2. hisztogram – Jelölje ki az „A" területet a 2. hisztogramon, amely tartalmazza az összes CD45
3. 3. hisztogram – Jelölje ki az „A" és a „B" (AB) területet a 3. hisztogramon, amely tartalmazza az összes CD45
CD34
eseményt.
+
4. 4. hisztogram – Jelölje ki az „A", „B" és „C" területet (ABC) a 4. hisztogramon, hogy megjelenítse az
összes CD45
CD34
+
közepestől a magasig terjed, és a CD45 expressziója alacsony. Az ABCD terület eseményei valódi CD34
HPC események.
5. 5. hisztogram – Nincs kapuzva, hogy minden esemény megjelenjen.
6. 6.
hisztogram – Jelölje ki az „E" területet, amely a limfocitákat tartalmazza vizuális ellenőrzésként a
diszkriminátoron.
7. 7. hisztogram – Hozzon létre egy H területet a 7. hisztogramon, amely megjeleníti az összes Stem-Count
vagy Flow-Count Fluorospheres gömböt, beleértve a duplákat is.
8. 8. hisztogram – Jelölje ki az „A" területet a 8. hisztogramon, amely tartalmazza a CD45
Az áramlási citométer beállítása
1. Biztosítsa, hogy az áramlási citométer megfelelően, a gyártó és a laboratórium irányelvei alapján
legyen megfelelő irányba beállítva és standardizálva a fényszóráshoz és a fluoreszcencia-intenzitáshoz.
B60231–AE
eseményt, amelynél alacsony vagy közepes az oldalra szóródás (Side
+
eseményt.
halvány
megrajzolva.
HPC események abszolút számának automatikus számítását (további
+
(7-AAD-negatív
eseménnyel halmozott eseményt, amelynek a Side scatter (oldalra szóródás) értéke
+
események) leállítási számnak a 2. hisztogramon.
+
események)
a
nem
71 of 128
eseményeken a CD45
+
élő
(főként
7-AAD-festésre
eseményeket.
+
+
hisztogramon az
pozitív
eseményt.
+
+
+