Beckman Coulter IM3632 Manual De Instrucciones página 123

Exemplo de análise
Os histogramas apresentados no ANEXO são exibidos em uma ordem crescente de números conforme
demonstrado no protocolo.
Cálculo das células de controle Stem-Trol CD34
Usando resultados de citometria de fluxo ajustados automaticamente com a concentração testada de fluoroesferas
Stem-Count ou Flow-Count obtida usando o software do System II (Versão 3.0) e um citômetro de fluxo COULTER
EPICS XL/XLMCL.
Para obter determinações de contagens absolutas calculadas automaticamente nos citômetros de fluxo COULTER
EPICS XL/XL-MCL, a concentração testada correta de fluoroesferas Stem-Count ou Flow-Count deve ser inserida
antes da aquisição da amostra.
Insira "CAL" como o nome da Região G de singletos de fluoroesferas Stem-Count ou Flow-Count e insira o valor,
por exemplo, 1.000, na caixa CAL FACTOR (Fator CAL) na tela de diálogo STATISTICS (Estatísticas) do menu
SET-UP SCREEN PROTOCOL (Configuração de protocolo da tela).
Inserção do fator CAL para as fluoroesferas Stem-Count ou Flow-Count:
1. Na tela Acquisition Run (Execução de aquisição), selecione Setup Screen >> Protocol (Configuração de
protocolo da tela).
2. Selecione Statistics (Estatísticas) >> CAL FACTOR (Fator CAL).
3. Insira o número do fator CAL (concentração testada) do frasco de fluoroesferas Stem-Count ou Flow-Count.
4. Pressione ENTER.
5. Selecione OKAY.
6. No prompt, digite "Y" para sim.
Quando são adquiridos pelo menos 1.000 singletos de fluoroesferas, a contagem absoluta para as células de
controle Stem-Trol CD34
das estatísticas da Região D.
Tabela (abaixo):
Exemplo de estatísticas obtidas com o tubo TROL 45/34/7-AAD no software System II, usando a função CAL
FACTOR (Fator CAL), onde:
• 1.024 é a concentração testada de fluoroesferas Stem-Count.
• 5.248 é o número total de fluoroesferas acumuladas na região CAL durante o tempo total de aquisição.
Neste exemplo, todas as contagens são ajustadas para: 1.024/5.248.
Estat.: hist. não
normalizado
1
2
3
4
7
5
1. Registre as contagens absolutas ajustadas (células/µL) nas Regiões D dos tubos TROL 45/34/7-AAD.
.
Exemplo:
.
Tubo TROL 45/34/7-AAD: células de controle Stem-Trol = 248 células/µL.
2. Multiplique essa contagem precisa pelo fator de normalização (N) = 5.
.
OBSERVAÇÃO:
.
B60231–AE
é ajustada automaticamente e pode ser obtida diretamente dos resultados impressos
+
A
B
C
D
G
H
+
Lista de
delimitação:
identificação de
região desativada
LEUC.
CD34 POS
CD45 DIM
Células de controle
Stem-Trol
CAL 1024
Todas as
fluoroesferas
Stem-Count
123 of 128
Contagens
ajustadas
(células/µL)
9.798
279
264
248
1.024
1.046