Beckman Coulter IM3632 Manual De Instrucciones página 52

Stem-Trol Kontrollceller
IM3632
För in vitro diagnostiskt bruk
AVSEDD ANVÄNDNING
Stem-Trol Control Cells är en analyserad kvalitetskontrollprodukt för analys med immunfenotypning och
användning av CD45- och/eller CD34-monoklonala antikroppsreagenser och flödescytometri. Den tillhandahåller
en positiv cellkontroll som bearbetas på samma sätt som ett blodprov när Stem-Trol Control Cells används för att
spetsa ett perifert helblodsprov. Detta möjliggör verifiering av reagensprestanda och av de metoder som används
för färgning av målceller (d.v.s. CD34+ hematopoetiska progenitorceller, HPC), lysering av erytrocyter och analys
av prover med flödescytometri.
I bipacksedeln för Stem-Kit-reagens (Ref. IM3630) finns fullständiga anvisningar för manuell analys. Se guiden
för stemCXP-systemet som medföljer stemCXP-systemprogramvaran för fullständiga anvisningar om du använder
den automatiserade analysen.
SAMMANFATTNING
Analys med immunfenotypning och flödescytometri inbegriper identifiering och beräkning av målceller i biologiska
prover. Proverna av intresse färgas med monoklonala antikroppar och erytrocyter lyseras innan flödescytometrisk
analys utförs. En positiv cellkontroll behövs för att verifiera reagensprestanda, provberedningsmetoder och
färgningsprocedurer (1). En positiv cellkontroll bör efterlikna en representativ målcell vad gäller monoklonal
antikroppsprestanda, erytrocytlysering och flödescytometrisk analys.
Stem-Trol Control Cells är en beredning i vätskeform av stabiliserade KG-1a-härledda celler som har antigenuttryck
och CD45- och CD34-färgningsegenskaper representativa för de som återfinns på CD34+ HPC.
PRINCIP
Stem-Trol Control Cells är konserverade KG-1a-celler som har modifierats och stabiliserats så att de uttrycker
CD34 klass III-epitoper (2) och CD45 gemensamt leukocytantigen vid densiteter som är näraliggande normala
omogna humana hematopoetiska celler. En blandning av Stem-Trol Control Cells tillsatta till normalt färskt helblod
färgas först med de monoklonala antikroppsreagenserna och 7-AAD-viabilitetsfärg och lyseras sedan i syfte att
ta bort erytrocyter. Stem-Count eller Flow-Count Fluorospheres tillsätts för direkt bestämning av absoluta antal.
Det absoluta antalet målceller bestäms med flödescytometrisk analys av den färgade och lyserade beredningen.
Förväntade resultat bestäms med hjälp av Stem-Kit-reagenser på verifierade och standardiserade FC 500
flödescytometersystem med CXP-systemprogramvara (version 2.0) för att analysera prov.
REAGENSER
Stem-Trol Control Cells är suspenderade i en isotonisk lösning, innehållande stabiliseringsmedel och BSA. Den
analyserade cellkoncentrationen (celler/µL) är härledd från flera replikatanalyser utförda med referensmetoden.
Det specifika värdet finns på flaskans etikett.
VARNING OCH FÖRSIKTIGHETSÅTGÄRDER
1. Prover och annat material som kommer i kontakt med dessa ämnen ska hanteras som material som kan
överföra infektion och kasseras enligt gällande föreskrifter.
2. Pipettera aldrig med munnen och låt inte prover eller reagenser komma i kontakt med hud och slemhinnor.
3. Använd inte reagenset efter utgångsdatumet som anges på flaskans etikett.
4. Frys inte reagenser.
5. Exponera inte reagens för värme under förvaring eller användning.
6. Undvik avdunstning och läckage av reagens genom att försluta flaskorna tätt efter användning, annars kan
felaktiga resultat uppkomma.
7. Stem-Trol Control Cells sedimenterar över tid. Se till att cellerna är fullständigt suspenderade före användning.
Undvik överdriven blandning för att minimera bildande av luftbubblor. Pipettera inte luftbubblor. Det kan leda
till felaktiga resultat.
8. Använd en kalibrerad positiv förskjutningspipett eller repeater-pipett för att dosera prover och Stem-Trol
Control Cells, annars kan felaktiga resultat uppkomma.
9. Använd pipetteringstekniker som rekommenderas av pipettillverkaren för att säkerställa korrekt och exakt
pipettering av prover och Stem-Trol Control Cells, annars kan felaktiga resultat uppkomma.
B60231–AE 52 of 128