Beckman Coulter IM3632 Manual De Instrucciones página 87

Výpočet počtu buněk Stem-Trol Control Cells CD34
Použití výsledků průtokové cytometrie upravených automaticky s použitím stanovené koncentrace přípravku
Stem-Count nebo Flow-Count Fluorospheres získané použitím softwaru System II (verze 3.0) a průtokového
cytometru COULTER EPICS XL/XLMCL.
Aby bylo možné automaticky zjišťovat absolutní počet na průtokových cytometrech COULTER EPICS XL / XL-MCL,
musí být před získáním vzorků zadána správná stanovená koncentrace přípravku Stem-Count nebo Flow-Count
Fluorospheres.
Jako název oblasti G singletů přípravku Stem-Count nebo Flow-Count Fluorospheres zadejte text „CAL" a poté
zadejte příslušnou hodnotu (například 1000), do pole CAL FACTOR (Faktor CAL) na obrazovce s dialogem
STATISTICS (Statistika) v nabídce SET-UP SCREEN PROTOCOL (Nastavení protokolu obrazovky).
Zadání položky CAL Factor (Faktor CAL) pro přípravek Stem-Count nebo Flow-Count Fluorospheres:
1. Na obrazovce Acquisition Run (Spuštění získávání) vyberte možnost Setup Screen >> Protocol (Nastavení
protokolu obrazovky).
2. Vyberte možnost Statistics (Statistika) >> CAL FACTOR (Faktor CAL).
3. Zadejte číslo faktoru CAL (stanovená koncentrace) uvedené na lahvičce s přípravkem Stem-Count nebo
Flow-Count Fluorospheres.
4. Stiskněte klávesu ENTER.
5. Vyberte možnost OKAY (OK).
6. Po zobrazení výzvy zadejte znak Y (ano).
Po získání alespoň 1000 singletů fluorescenčních částic je automaticky upraven absolutní počet pro buňky
Stem-Trol Control Cells CD34
Tabulka (viz níže):
Příklad statistiky zjištěné s použitím zkumavky TROL 45/34/7-AAD v softwaru System II s použitím funkce CAL
FACTOR (Faktor CAL), kde:
• 1024 je stanovená koncentrace přípravku Stem-Count Fluorospheres.
• 5248 je celkový počet fluorescenčních částic nashromážděných v oblasti CAL během celé doby získávání.
V tomto příkladu jsou všechny počty upraveny v poměru 1024/5248.
Statistika:
Nenormalizovaný
histogram
1
2
3
4
7
5
1. Zaznamenejte upravené absolutní počty (buňky/µl) v oblastech D ze zkumavek TROL 45/34/7-AAD.
.
Příklad:
.
Zkumavka TROL 45/34/7-AAD: buňky Stem-Trol Control Cells = 248 buněk/µl.
2. Tento přesný počet vynásobte normalizačním koeficientem (N) = 5.
.
POZNÁMKA:
.
Je třeba normalizovat absolutní počet buněk Stem-Trol Control Cells s ohledem na objemy přidané během provádění
testu: Určete hodnotu N vydělením objemu reference pro počet (singlety přípravku Stem-Count Fluorospheres) objemem
buněk Stem-Trol Control Cells přidaných do zkumavky.
.
. .
B60231–AE
a lze jej převzít přímo z výsledků ve výtisku statistiky pro oblast D.
+
Gatovaní režimu
výpisu: Zakázané
ID oblasti
A
B CD34 POS
C CD45 DIM
D
Stem-Trol Control
G CAL 1024
H Všechny přípravky
Stem-Count
Fluorospheres
+
Upravené počty
(buňky/µl)
LEUKS
Cells
87 of 128
9 798
279
264
248
1 024
1 046