Beckman Coulter IM3632 Manual De Instrucciones página 38

Células de controlo Stem-Trol
IM3632
Para fins de diagnóstico in vitro
UTILIZAÇÃO PREVISTA
Stem-Trol Control Cells é um produto de controlo de qualidade ensaiado para análise por imunofenotipagem
utilizando reagentes de anticorpos monoclonais CD45 e/ou CD34 e citometria de fluxo. Fornece um controlo de
células positivo que é processado da mesma forma que um espécime de sangue quando se mistura Stem-Trol
Control Cells numa amostra de sangue periférico. Isto permite verificar o desempenho dos reagentes e dos
métodos utilizados para coloração de células alvo (ou seja, células progenitoras hematopoiéticas [HPC] CD34+),
efetuar a lise de eritrócitos e analisar amostras por citometria de fluxo.
Consulte o folheto informativo de Stem-Kit Reagents (REF IM3630) para obter instruções completas em caso de
análises manuais. Consulte o stemCXP System Guide (Manual do sistema stemCXP) fornecido com o software
do sistema stemCXP para obter instruções completas se for utilizada a análise automatizada.
RESUMO
A análise por imunofenotipagem mediante citometria de fluxo implica a identificação e quantificação de células
alvo em espécimes biológicos.
monoclonais e os eritrócitos são submetidos a lise antes da análise por citometria de fluxo. É necessário um
controlo de células positivo para verificar o desempenho dos reagentes, os métodos de preparação de amostras
e os procedimentos de coloração (1). Um controlo de células positivo deve imitar uma célula alvo representativa
em termos de desempenho de anticorpos monoclonais, lise de eritrócitos e análise por citometria de fluxo.
Stem-Trol Control Cells é uma preparação líquida de células derivadas de KG-1a estabilizadas que têm uma
expressão de antigénios e propriedades de coloração CD45 e CD34 representativas das encontradas em HPC
CD34 +.
PRINCÍPIO
Stem-Trol Control Cells são células KG-1a conservadas que foram modificadas e estabilizadas para expressar
epítopos CD34 da classe III (2) e o antigénio comum de leucócitos CD45 a densidades semelhantes às das
células hematopoiéticas humanas imaturas normais. Uma mistura de Stem-Trol Control Cells com sangue total
novo normal é primeiramente submetida a coloração com os reagentes de anticorpos monoclonais e marcador
de viabilidade 7-AAD e posteriormente submetida a lise para eliminar eritrócitos. Adiciona-se Stem-Count
Fluorospheres ou Flow-Count Fluorospheres para obter uma determinação direta de contagens absolutas. A
análise por citometria de fluxo da preparação submetida a lise e coloração determina a contagem absoluta das
células alvo. Os resultados esperados são determinados utilizando Stem-Kit Reagents em sistemas de citometria
de fluxo FC 500 validados e normalizados, equipados com software do sistema CXP (versão 2.0) para analisar
amostras.
REAGENTES
As Stem-Trol Control Cells encontram-se suspensas numa solução isotónica que contém estabilizadores e BSA.
A concentração de células ensaiada (células/µL) deriva de várias análises replicadas utilizando o método de
referência. Este valor específico encontra-se no rótulo do respetivo recipiente.
AVISOS E PRECAUÇÕES
1. Espécimes, amostras, bem como qualquer material em contacto com os mesmos, devem ser considerados
como potencialmente infecciosos, e deverão ser eliminados de acordo com os procedimentos apropriados.
2. Nunca pipete com a boca e evite qualquer contacto de amostras ou reagentes com a pele e as mucosas.
3. Não utilize reagentes para além do prazo de validade indicado no rótulo do respetivo recipiente.
4. Não congele os reagentes.
5. Não exponha o reagente a calor durante o armazenamento ou a utilização.
6. Evite a evaporação e a fuga de reagentes fechando bem os recipientes após cada utilização, caso contrário
podem ocorrer resultados errados.
7. As Stem-Trol Control Cells criam depósito com o passar do tempo. Certifique-se de que as células estão
novamente suspensas antes de as utilizar. Evite a mistura excessiva para minimizar a formação de bolhas
de ar. Não pipete bolhas de ar ou podem ocorrer resultados errados.
B60231–AE
Os espécimes de interesse são submetidos a coloração com anticorpos
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