Beckman Coulter IM3632 Manual De Instrucciones página 74

Stem-Trol komórki kontrolne
IM3632
Do in vitro użycia diagnostycznego
ZASTOSOWANIE
Komórki kontrolne Stem-Trol Control Cells to oznaczany produkt kontroli jakości do analizy immunofenotypowania
przy użyciu odczynników przeciwciał monoklonalnych CD45 i (lub) CD34 i cytometrii przepływowej. Zapewnia to
dodatnią kontrolę komórkową, która jest przetwarzana w taki sam sposób jak próbka krwi, gdy komórki kontrolne
Stem-Trol Control Cells są dodawane do próbki obwodowej krwi pełnej. Pozwala to na weryfikację wydajności
odczynnika i metod stosowanych do barwienia celowanych komórek (tj. komórek macierzystych szpiku CD34+
HPC), lizę erytrocytów i analizowanie próbek za pomocą cytometrii przepływowej.
W ulotce dołączonej do opakowania odczynników Stem-Kit Reagents (REF IM3630) znajdują się pełne instrukcje
przeprowadzania analizy ręcznej. Pełne instrukcje w przypadku stosowania analizy automatycznej zawiera
stemCXP System Guide (Przewodnik systemu stemCXP) dostarczony z oprogramowaniem systemu stemCXP.
PODSUMOWANIE
Analiza immunotypowania przy użyciu cytometrii przepływowej obejmuje identyfikację i numerowanie celowanych
komórek w próbkach biologicznych. Wybrane próbki są barwione przeciwciałami monoklonalnymi i erytrocyty są
poddawane lizie przed analizą za pomocą cytometrii przepływowej. Wymagana jest dodatnia kontrola komórkowa
w celu zweryfikowania wydajności odczynnika, metod przygotowywania próbki oraz procedur barwienia
(1). Dodatnia kontrola komórkowa powinna naśladować reprezentatywne celowane komórki pod względem
wydajności przeciwciał monoklonalnych, lizy erytrocytów oraz analizy za pomocą cytometrii przepływowej.
Komórki kontrolne Stem-Trol Control Cells to płynny preparat stabilizowanych komórek pochodzących od
KG-1a, które wykazują ekspresję antygenu oraz właściwości barwienia CD45 oraz CD34 reprezentatywne dla
występujących na CD34+ HPC.
ZASADA
Komórki kontrolne Stem-Trol Control Cells to konserwowane komórki KG-1a, które zostały zmodyfikowane
i stabilizowane w celu ekspresji epitopów CD34 klasy III (2) i wspólnych alergenów leukocytów CD45 przy
gęstościach, które są zbliżone do prawidłowych niedojrzałych ludzkich komórek szpiku. Mieszanina komórek
kontrolnych Stem-Trol Control Cells dodanych do prawidłowej świeżej krwi pełnej jest najpierw barwiona
odczynnikami przeciwciała monoklonalnego i barwnikiem żywotności 7-AAD Viability Dye, a następnie poddawana
lizie w celu usuwania erytrocytów.
do pierwszego oznaczania liczb bezwzględnych.
i poddawanego lizie determinuje liczbę bezwzględną celowanych komórek. Wyniki oczekiwane są określane
przy użyciu odczynników Stem-Kit Reagents na zwalidowanych i standaryzowanych systemach cytometrii
przepływowej FC 500 wyposażonych w oprogramowanie systemu CXP (wersja 2.0) do badania próbek.
ODCZYNNIKI
Komórki kontrolne Stem-Trol Control Cells są zawieszane w roztworze izotonicznym zawierającym stabilizatory
i BSA. Stężenie oznaczanych komórek (komórki/µL) jest uzyskiwane z wielu analiz powtórzonych przy użyciu
metody referencyjnej. Określona wartość znajduje się na etykiecie fiolki.
OSTRZEŻENIE I ŚRODKI OSTROŻNOŚCI
1. Z próbkami i wszelkimi materiałami wchodzącymi z nimi w kontakt należy obchodzić się jak z materiałami
potencjalnie zakaźnymi i usuwać je z zachowaniem odpowiednich środków ostrożności.
2. Nigdy nie brać pipety do ust i unikać kontaktu próbek lub odczynników, ze skórą oraz błonami śluzowymi.
3. Nie stosować odczynników po upłynięciu daty ważności oznaczonej na etykiecie fiolki.
4. Nie zamrażać odczynników.
5. Podczas przechowywania lub stosowania nie narażać odczynników na ciepło.
6. Unikać parowania i wycieku odczynnika zamykając szczelnie fiolki po użyciu. W przeciwnym razie uzyskane
wyniki mogą być błędne.
7. Komórki kontrolne Stem-Trol Control Cells osiądą po dłuższym czasie.
upewnić, że wszystkie komórki ponownie uległy zawieszeniu. Unikać zbyt intensywnego mieszania, aby
zminimalizować powstawanie pęcherzyków powietrza. Nie pobierać pipetą pęcherzyków powietrza, gdyż
może to spowodować uzyskanie błędnych wyników.
B60231–AE
Fluorokulki Stem-Count lub Flow-Count Fluorospheres są dodawane
Analiza cytometrii przepływowej preparatu barwionego
74 of 128
Przed użyciem należy się